1樓:匿名使用者
如果是分泌蛋白,可以從培養上清中純化。
如果是胞內蛋白,最好在蛋白上接乙個tag,比如flag-tag,然後用flag的抗體進行親和純化。
做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決
2樓:匿名使用者
做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決實際上真核生物的蛋白也可以用
內真核細胞容蛋白表達系統來實現,而且效果往往更好。
用原核生物來表達主要還是因為操作簡單,快速。如果希望表達和純化的蛋白性質穩定,經原核系統表達之後仍然有正確的摺疊構象,那麼使用原核表達系統就很合適了。
有的時候在不同的表達體系裡面對蛋白的表達量是有影響的。
當構建完成後攜帶有訊號肽的時候,一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後,直接表達成熟肽,表達水平明顯提高。
所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。
原核生物中表達真核蛋白應該注意什麼問題
3樓:匿名使用者
因為原核生物缺乏復翻譯後的制修飾,所以表達的真核蛋白和真核中表達有所差異,可能沒有生物學活性等,但是要是做免疫原應該沒問題;
基因需為cdna,不能含有內含子,原核細胞不能對mrna進行剪下;
要分析dna序列資訊,分析其密碼子,由於原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時可能會出現稀有密碼子而影響表達的情況;
要注意你要表達蛋白的大小問題,一般情況下大於70kd的蛋白在原核菌種不容易表達或表大量低;
原核表達出來的一般是包涵體,所以蛋白的復性很關鍵,否則表達出來了也不能用,沒有活性。
自然界真核細胞中有質粒存在嗎，真核生物中存在質粒嗎？或質粒只存在與原核生物中嗎？
微生物中就有質粒存在，而真核細胞中就有屬於微生物的 真核有 質來 粒是染自色體外能夠進行自bai 主複製的遺傳單位，包du括真核生物的細胞器zhi和細菌細胞中染dao色體以外的脫氧核糖核酸 dna 分子。換句話說，你細胞中的線粒體dna也算是質粒，植物中的葉綠體dna也算是 不過我們做題時質粒一般是...
如何在excel中建立資料透視表
設資料簡略如抄圖 游標放在資料區襲 域內的乙個單元格裡，或全選資料區域 a1 e8 點 資料 資料透視表和資料透檢視 下一步 下一步 現有工作表 游標放在下面方框內 點方框 帶 的圖示 點表sheet6的a1單元格，如圖 布局 將 班級 拖至 頁 將 日期 拖至 行 將 姓名 拖至 列 將 遲到 拖...
如何在中輸入電流錶電壓表符號，謝謝
工具欄 最右邊 有乙個帶圈字元 進去以後 在文字裡輸入 v 選擇增大圈號 然後確定 剩下 的 橫線 自己輸入 就行 工具欄找 插入 點 特殊符號 然後在裡邊找 請問一下怎麼在word裡面打直流電壓符號 利用公式編輯器mathtype 1 開啟公式編輯器 2 選擇下圖中帶有一模線的公式模板 單擊 3 ...