要想將某個特定基因與質粒相連線,需要幾種限制性內切酶和DNA

2021-03-28 05:58:41 字數 4026 閱讀 2625

1樓:歐公尺加的不甘

如果該基因段兩邊一樣的話就一種內切酶,一種連線酶,如果不一樣就都兩種。

2樓:匿名使用者

需要一種限制性內切酶,產生相同的粘性末端

連線酶也是一種,末端相同

在獲得目的基因的過程中,需要使用限制性核酸內切酶和dna連線酶等工具酶,對的嗎?

3樓:p圖十字軍

只是獲得目的基因,用限制性內切酶切下來就能拿到了,不用dna連線酶吧?將這個片段重組到別的dna粘性末端上面,採用dna連線酶。

可能是這樣子錯了。

4樓:秋色果園

可以說是對的,因為你轉殖獲得一新基因,一般都是連線到t載體上,然後用限制性內切酶進行酶切鑑定,正確後要進行測序,如果對了,你想要構建真核表達載體就要用到連線酶。

5樓:匿名使用者

需要限制性核酸內切酶把目的基因從質粒上切下來,就像嫁接植物時要先把嫁接的枝條剪下來一樣。

(2009?普陀區一模)如圖(一)為某基因工程中利用的質粒筒圖,小箭頭所指分別為限制性內切酶ecori、bamh

6樓:愛刷_棍哥

(1)在基因工程中常用的工具有三種:一是用作切取目的基因限制酶;二是將目的基因與運載體拼接的dna連線酶;三是作為運載體的質粒.

(2)用同一種限制酶將有目的基因的dna與運載體(質粒)切割,形成相同的黏性末端,經dna連線酶進行拼接形成重組dna,可能有「目的-目的基因」、「目的基因-運載體」、「運載體-運載體」三種,其中有效的(所需要的)重組dna是目的基因-運載體.

(3)圖(一)所示的質粒中含有tctr為四環素(抗生素)抗性基因,拼接形成的3種拼接產物(重組dna)與無任何抗藥性的原核宿主細胞接種到含四環素的培養基中,能生長的原核宿主細胞所含有的拼接產物必需含有四環素抗性基因,即運載體-運載體、目的基因-運載體.

(4)據圖分析,p為啟動子,是rna聚合酶識別和結合的位點;將重組dna匯入動物受體細胞的常用方法是顯微注射法.

(5)在基因工程中,限制酶(限制性內切酶)能識別特定的核苷酸序列,並在特定的位點切割磷酸二酯鍵,即作用於圖(二)的a位置;dna解旋酶作用於氫鍵,即b位置.

故答案為:

(1)限制酶(限制性內切酶)    dna連線酶

(2)目的基因-目的基因   目的基因-運載體   運載體-運載體   目的基因-動載體

(3)運載體-運載體   目的基因-運載體

(4)p(啟動子)   顯微注射法

(5)限制酶(限制性內切酶)   dna解旋酶

在基因工程中,提取目的基因通常使用的工具是(  )a.質粒b.紫外線c.dna連線酶d.限制性核酸內切

7樓:you條

a、質粒是基因工程中的運載體,一般用於將目的基因匯入受體細胞中,a錯誤;

b、紫外線不屬於基因工程的工具,一般用於誘導基因突變,b錯誤;

c、dna連線酶一般用於將切割後的目的基因和質量連線,形成重組質粒,c錯誤;

d、限制性核酸內切酶能夠識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,一般在基因工程中用於提取目的基因,d正確.

故選:d.

要使目的基因與對應的載體重組,所需的兩種酶是(  )①限制性核酸內切酶 ②dna連線酶 ③dna解旋酶

8樓:匿名使用者

構建基因表達載體bai的構建du過程:

首先需要用同種

zhi限制酶核酸內dao切酶切割含有目的基內因的外容源dna分子和運載體,以產生相同的黏性末端;

其次用dna連線酶將目的基因和運載體連線形成重組dna分子.由此可見,要使目的基因與對應的載體重組,所需的兩種酶是限制性核酸內切酶和dna連線酶.

故選:a.

圖1表示應用基因工程技術獲得人們需要的生物新品種或新產品.請據圖回答下列問題:(1)在培育轉人生長激

用dna連線酶把被限制性核酸內切酶i(識別序列和切點是-↓gatc-)切割過的質粒和被限制性核酸內切酶ⅱ(識

9樓:緣來如此

重組抄dna分子要能夠再被限制酶ⅱ切割開,就也應該具有識別序列和切點:-g↓gatcc-,而題中所述切割後重組有兩種情況:

情況一:

-↓gatc- -g↓gatc c- -gatc c-

- ctag↑- -c ctag↓g- -ctag g-

運載體片段 目的基因片段 重組dna分子片段

情況二:

-↓gatc- -g↓gatc c- -g gatc-

- ctag↑- -c ctag↓g- -c ctag-

運載體片段 目的基因片段 重組dna分子片段

若要每種情況都含序列-g↓gatcc-,情況一重組dna分子片段左側鹼基須是g,概率為1/4(a、g、c、t之一),情況二重組dna分子片段右側鹼基須是c,概率同為1/4(a、g、c、t之一),情況一有3/4概率無法切開,情況二也有3/4概率無法切開,1-3/4*3/4=7/16。故選b。

10樓:猥瑣註冊

根據題意,該重bai組dudna分子能夠再被限制性核酸內切zhi

酶daoi切割開,必需具有限制性回核酸內切酶i識別答序列和切點:-↓gatc-,而上圖形成的重組dna分子的兩種情況中均具有-gatc-序列,因此被限制性核酸內切酶i切割開來的概率為1.

故選a.

如圖是基因工程主要技術環節的乙個基本步驟,這一步驟需用到的工具是(  )a.dna連線酶和解旋酶b.dna

11樓:手機使用者

圖示表示基因表達載體的構建過程,該過程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源dna分子和質粒,其次還需要用dna連線酶將目的基因和質粒連線形成重組質粒.

故選:c.

如何使目的基因與質粒結合形成重組質粒?

12樓:

先用bai同一種限制性核酸內切du

酶切割目的zhi基因和質粒,露出相對dao應的粘性末端,再用回dna連線答酶使兩者的粘性末端結合形成重組質粒。

質粒是目的基因的運載體,在用鳥槍法或人工合成法提取目的基因後,用限制性內切酶將質粒切開,使目的基因與切開的質粒具有相同的粘性末端。它們的鹼基恰好配對,氫鍵自動結合,再用dna連線酶將切口補上,重組質粒就形成了。

擴充套件資料

有兩種情況可使雜交後代出現新的基因組合的個體(重組體):

(1)非連鎖基因的自由組合。例如純合的非糯紅公尺水稻品種與糯性白公尺水稻品種雜交,子二代有四種型別的植株,其中非糯紅公尺和糯性白公尺的植株分別與兩親本的性狀相同,稱為親本組合;另有非糯白公尺和糯性紅公尺兩種植株則是兩親本所沒有的重新組合,即重組體。

(2)連鎖基因的交換。例如,已知玉公尺種子的有色對無色為顯性,飽滿對凹陷為顯性,用純種有色飽滿玉公尺與無色凹陷玉公尺雜交,子一代種子均為有色飽滿,以f1與雙隱性(無色凹陷)親本回交,結果也出現四種型別,其中有色飽滿和無色凹陷為親本組合,約佔96%;有色凹陷和無色飽滿為新組合(重組體),約佔4%,後者就是同源染色體的非姊妹染色單體上部分基因發生了交換的結果。

13樓:匿名使用者

1、用相同的限制

bai性du內切酶分別處理目的

zhi基因、質粒(目dao的基因兩端有酶切位點)專2、再把兩屬

種片段混合,加入dna連線酶

3、還要篩選,因為有可能得到的不是目的基因+質粒,還可能目的基因+目的基因、質粒+質粒......

望採納哦親~

14樓:匿名使用者

首先質粒和目地基因要有相同的切割位點,再用限制性核酸內切酶切割目地基因和質粒,再把切好的目地基因和質粒用連線酶連線就行了.

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