1樓:張家琛
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:
1)塗片固定。在無菌操作條件下,用接種環挑取少量細菌於乾淨的載玻片上塗布均勻,固定。
2)草酸銨結晶紫染1分鐘。
3)自來水沖洗,去掉浮色。
4) 用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘,傾去多餘溶液。
5)用中性脫色劑如乙醇(95%)或丙酮酸脫色30秒,革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色,革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色。
6)用蕃紅染液復染30秒,革蘭氏陽性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現紅色。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌即被區別開。
口訣 1 1 半 半。
一分鐘 30秒。
革蘭氏染色的步驟和原理
2樓:江南蜜汁
原理:革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌(g+)和革蘭氏陰性菌(g-)兩大類,是細菌學上最常用的鑑別染色法。該染色法之所以能將細菌分為g+菌和g-菌,是因為一般認為革蘭氏染色是基於細菌細胞壁特殊化學組分進行染色的。
步驟:(一)塗片固定。
在乾淨的載玻片**滴加一滴蒸餾水,用接種環進行無菌操作,挑取培養物少許,置載玻片的水滴中,與水混合做成菌懸液並塗布成直徑約1cm的薄層。
二)染色。在固定過的塗片菌膜上滴加草酸銨結晶紫染液,染色液應完全覆蓋整個菌膜,染色1min。
三)水洗。染色到一定的時間,拿住玻片使之成450角,用細小的水流把多餘的染料沖洗掉,被菌體吸附的染料則保留。
四)媒染。加碘液覆蓋塗面染1 min。在媒染處理時,媒染劑與染料形成不溶性的化合物,可增加染料和細菌的親和力。
五)水洗,用吸水紙吸去水分。
用細小的水流緩慢沖洗塗片上的染色液,用吸水紙吸乾。
六)脫色。加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色, 20 s~30 s後再進行水洗,吸去水分。
七)復染。蕃紅染色液染色10 s後, 自來水沖洗。
八)乾燥,鏡檢。
染色的結果,革蘭氏正反應菌體都呈紫色,負反應菌體都呈紅色。
3樓:林與潘
一、 目的:在細胞發放之前,利用標準的革蘭氏染色法對即將發放的細胞懸液進行檢測,判斷細胞懸液中是否含有革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌。
二、 原理:
4樓:張鈺濤
步驟:包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。
原理:染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑑定。
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法,1884年由丹麥醫師gram創立。未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑑定。
革蘭氏染色屬復染法。
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法,這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭(hans christian gram,1853年-1938年)於1884年所發明,最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係。
未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察陽性紫色陰性紅色。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑑定。
革蘭氏染色的關鍵步驟是什麼
5樓:乾萊資訊諮詢
革蘭氏染色法。
一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:
1)塗片固定。
2)草酸銨結晶紫染1分鐘。
3)蒸餾水沖洗。
4)加碘液覆蓋塗面染約1分鐘。
5)水洗,用吸水紙吸去水分。
6)加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,20秒後水洗,吸去水分。
7)蕃紅染色液(稀)染櫻棗1分鐘後,蒸餾水沖洗。乾燥,鏡檢。
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外膜允許小分子物質通過 培養細菌時加入的營養物質也會被細菌分泌的酶分解成小分子物質再供其吸收 溶菌酶不可以通過外模,所以革蘭氏陰性菌對溶酶體,抗生素不敏感。溶菌酶能溶解細菌細胞壁的肽聚醣,革蘭氏陰性菌的細胞壁含的脂質比肽聚醣多,肽聚醣很少,所以溶菌酶對革蘭氏陰性菌並不起作用。文不對題,我猜是因為革蘭...