某種限制性內切酶作用於DNA後,產生的末端必定是黏性末端嗎?

2025-03-18 11:55:29 字數 1409 閱讀 2410

1樓:匿名使用者

高中階段來說襪鄭是這樣液咐的,之所以說是黏性末端是因為磷酸二脂鍵被破壞後又能形成新的告埋頌磷酸二脂鍵(滿足鹼基互補配對原則,就像具有黏性,所以叫著黏性末端。

不同的dna限制酶能夠切出相同的粘性末端嗎

2樓:biological宇宙

不同的限制性核酸內切酶可以切割出相同的粘性末端。

限制性核酸內切酶可以識別特定的識別序列,對其進行切割後留下兩種型別的末端:粘性末端和平末端,如果兩種不同的限制性核酸內切酶的識別序列是相同的,或者切割後所留下的切口是一樣的,那麼這兩種不同的限制性核算內切酶所留下的粘性末端就是一樣的。

關於限制性核算內切酶,能夠識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。

當限制性核算內切酶在它識別序列的中軸線兩側姜dna兩條鏈切開時,產生的是粘性末端;而當限制性核算內切酶在它識別序列中軸線處切開時,產生的則是平末端。

dna限制性內切酶酶切的影響因素

3樓:匿名使用者

當微量的汙染物進入限制性內切酶貯存液中時,會影響其進一步使用,因此在吸取限制性內專。

切酶時,每。

屬次都要用新的吸管頭。如果採用兩種限制性內切酶,必須要注意分別提供各自的最適鹽濃度。

若兩者可用同一緩衝液,則可同時水解。

若需要不同的鹽濃度,則低鹽濃度的限制性內切酶必須首先使用,隨後調節鹽濃度,再用高鹽濃度的限制性內切酶水解。也可在第乙個酶切反應完成後,用等體積酚/氯仿抽提,加倍體積3mol/l naac和2倍體積無水乙醇,混勻後置-70℃低溫冰箱30分鐘,離心、乾燥並重新溶於緩衝液後進行第二個酶切反應。

為什麼用兩種限制酶切有兩種不同的目的基因(產生兩種

4樓:匿名使用者

為什麼用兩種限來制酶切有兩種不同的源。

目的基因。用a、baib兩種酶切出du目的基因來,可以zhi防止自環。然後dao

再用a、b酶去切質粒,也可防自環,且得到與目的基因互補的黏性末端,才能連線目的基因。所以,既要用兩種不同酶切,還要保證質粒和目的基因一樣的兩種酶。兩種不同的限制性內切酶識別並切割的序列是不同的,也就是兩種酶分別切割了基因和載體時,產生了兩個切口,這兩個切口不是粘性末端,不能互補配對,所以不可能連線在一起,如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端,這樣基因本身除了切下來的那段之外,剩下的部分在連線酶作用下相同的粘性末端就會配對連線,同樣載體也會繼續連線成環,基因和載體連在一一起也有,而且首尾的順序也有兩種,連線體系跑電泳結果會有4個條帶,至少是4種,而且就算那個連線後的片段大小符合你要求的那段純化後也有一部分是不能表達的。

哪四種就不用寫了,你肯定知道的,不能表達的那部分就是順序不對的,這就是同種酶切連線的缺陷性。

的過程中,限制性內切酶的作用是什麼DNA連線酶的作

解旋酶 dna複製復時,解開dna的拓撲雙制鏈.也就是解開雙螺旋的bai作用.本質 切斷鹼du基間的氫鍵zhi 限制性內切酶 識別特異的鹼dao基序列,並切割成黏性末端或平末端.本質 切斷磷酸二酯鍵 dna連線酶 是將兩個dn 段連線到一起本質 連線磷酸二脂鍵 rna聚合酶 是在乙個rn 段上逐個新...

限制性內切酶在細胞內什麼時候表達(除了基因工程時)?DNA連

限制性內切酶是在原核細胞中提取的,因為原核細胞容易被其他dna汙染,所以產生限制酶來把他們切割,來防止自己死亡,真核生物不產生限制酶。dna連線酶同樣也是在原和生物體中存在,如果原核生物發現了對自己有利的基因,便會用限制酶把他切割,用dna連線酶將他連線到自己的dna上,dna連線酶是連線磷酸二脂鍵...

通 常用一種限制性內切酶處理含目的基因的DNA,用另一種處理

不對應該用一樣的酶 這樣才能得到一樣的粘性末端,目的基因和運載體才能結合一起。不對,一般是同時用兩種不同的限制性內切酶處理目的dna,再用相同的兩種酶同時處理載體。且一般要求產生粘性末端。下列關於基因工程的敘述,正確的是 a 通常用一種限制性核酸內切酶處理含目的基因的dna,用另一種 a 在基因工程...