1樓：網友
這個問題誰出的？
1.原理上可以檢測；用白介2標準品進行標準曲線的測定繪製標準曲線，然後通遊段租過你檢測到的值推算出白介2濃度；但是前提是你的樣品必須是純的白介2！
2.一般來說，檢測特定蛋白濃度一般是採用其特異性的反應進行吸光度的檢測，注意是特異性的方法；而考馬斯亮藍法檢測的其實是所有蛋白的濃度和，因為考馬斯亮藍神兆法可以和所有蛋白進行結合，而不是特異性得結合某燃鄭種蛋白。
3.因此建議你用elisa試劑盒檢測白介2濃度，這個是比較可靠的。
2樓：網友
繪製標準曲絕搜線。並昌歷詳情參見迅伏。
3樓：翅膀黑蜻蜓
先做蛋白濃度的標準曲線，再測定il-2的吸光度值。標準曲線用鏈跡廳牛血清蛋白，配成一定濃度，取5—6個點，用考馬斯亮藍染色，5min後在595nm下測定a值。然後吸取一定量的il-2溶液，加入5ml考馬，顯色後在595nm下測定a值，然後去利用州巖標準曲線得棚隱出濃度。
蛋白質含量測定考馬斯亮藍
4樓：愛情破產柒柒柒
蛋白質含量測定考馬斯亮藍亂兆實驗如下：
實驗原理：考馬斯亮藍(coomassie brilliant blue)法測定蛋白質濃度，是利用蛋白質―染料結合的原理，定量的測定微量蛋白濃度的備粗快速、靈敏的方法。這種蛋白質仿陪鎮測定法具有超過其他幾種方法的突出優點，因而正在得到廣泛的應用。
這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質測定法。
考馬斯亮蘭g-250染料，在酸性溶液中與蛋白質結合，使染料的最大吸收峰(lmax)的位置，由465 nm變為 595 nm，溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。通過測定595 nm處光吸收的增加量可知與其結合蛋白質的量。研究發現，染料主要是與蛋白質中的鹼性氨基酸(特別是精氨酸)和芳香族氨基酸殘基相結合。
考馬斯亮藍染色法的突出優點是：靈敏度高，據估計比lowry法約高四倍，其最低蛋白質檢測量可達1 mg。這是因為蛋白質與染料結合後產生的顏色變化很大，蛋白質-染料複合物有更高的消光係數，因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比lowry法要大的多。
測定快速、簡便，只需加一種試劑。完成乙個樣品的測定，只需要5分鐘左右。由於染料與蛋白質結合的過程，大約只要2分鐘即可完成，其顏色可以在1小時內保持穩定，且在5分鐘至20分鐘之間，顏色的穩定性最好。
因而完全不用像lowry法那樣費時和嚴格地控制時間；干擾物質少。
考馬斯亮藍法測蛋白濃度，具體步驟有哪些，需要什麼試劑？
5樓：網友
你參考一下這個，很詳細的。
考馬斯亮藍法和分光光度法法測蛋白濃度為什麼不相等
6樓：網友
分光光度法的機理是氨基酸殘基在280nm處有光吸收，通過od280換算蛋白濃度。
而考馬斯亮藍法的機理是考馬斯亮藍g250與蛋白有較強的非共價結合，通過od600換算蛋白濃度。
但是，分光光度法的準確性很差，因為各種氨基酸殘基對od280的貢獻不是均等的，某些芳香族氨基酸尤其高。而我們只能通過乙個平均值來進行換算，所以蛋白的氨基酸組成會影響分光光度法的準確性。
考馬斯亮藍法中，od600與氨基酸組成基本無關，線性範圍較寬，所以該法相對準確。
既然乙個準，乙個不準，那麼兩種方法的結果產生偏差也是正常的了。
標準蛋白質樣品能否用考馬斯亮藍法測定？為什麼？
7樓：糜溫牽淑
公式是根據測量結果自己算出來的：
考馬斯亮藍比色法是由bradford等人建立。
的1種測定微量蛋白質的方法l5]，考馬斯亮藍所含疏。
水基團在酸性條件下與蛋白質的疏水微區具有親和力，通過疏水作用與蛋白質相結合，形成的藍色蛋白質一染料複合物，在595
nm處有最大吸光度，複合物1
h內保持穩定。在一定的蛋白質濃度範圍內，蛋白質一染料複合物在595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比，因此可用於蛋白質含量的測定。
測定時，用同一種標準蛋白（自己選，如牛血清白蛋白，所選的標準蛋白最好是純化的待測蛋白——但這是理想狀態，一般選擇氨基酸構成與待測蛋白相近的標準蛋白。否則將影響測定結果）配製成覆蓋待測樣品蛋白濃度的標準蛋白溶液，然後加等量考馬斯亮藍g-250，混勻後用紫外分光光度計測定個標準蛋白樣品的吸光值。並測定待測樣品（可稀釋成幾個不同濃度的樣品同時測）的吸光值。
所有樣品重複測三次。
最後以蛋白標準溶液濃度為橫座標，以吸光度為縱座標，繪製標準曲線。計算出迴歸方程。如y=ax+b
讓後把待測樣品的吸光值代入迴歸方程，算出待測樣品濃度。
只要上資料庫一搜，這樣的**多的是，要加強自學能力呀！——賺點分真辛苦！
8樓：快樂無極限
考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度，是利用蛋白質-染料結合的原理，定量的測定微量蛋白濃度的快速、靈敏的方法。
考馬斯亮藍g-250存在著兩種不同的顏色形式，紅色和藍色。考馬斯亮藍g-250在酸性遊離狀態下呈棕紅色，最大光吸收在465nm，當它與蛋白質結合後變為藍色，最大光吸收在595nm。
在一定的蛋白質濃度範圍內，蛋白質-染料複合物在波長為595nm處的光吸收與蛋白質含量成正比，通過測定595nm處光吸收的增加量可知與其結合蛋白質的量。
生物化學蛋白質濃度測定只能夠考馬斯亮藍方法測定如何改進
9樓：網友
modified bradford protein assay kit
改良型bradford蛋白濃度測定試劑盒。
產品說明：在使用常規bradford試劑進行蛋白定量時，考馬斯亮蘭g-250染料分子之間，以及g-250與蛋白質複合物之間會發生聚集，隨著時間的延長，產生可見的易沉降的顆粒，使得在595nm處埋巨集測定的吸光度值a595時，蛋白質濃度的定量偏低。針對此種彎好冊情況，本試劑盒通過新增特殊的試劑，使得考馬斯亮蘭g-250染料分子之間，以及g-250與蛋白質複合物在30分鐘內不容易發生沉降，從而提高了測量結果的準確性。
使得大量樣品的定量變的從容不迫。
產品特點：1.在30分鐘內，g-250染料分子和g-250與蛋白質複合物不容易發生沉澱；
2.無論是分光光度法或酶標板法都有大小兩種定量範圍的操作方法；
3.還能夠適應疏水的膜或粘蛋白的定量；
4.比較合適於從容不迫地進行大量樣品的定量；
5.與常規的bradford法相比，線形關係更佳襪遊，保證了結果的準確性。
編號 包裝 ** 產地。
sk3041 1000 assays 360 生工。
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