1樓:南京金益柏生物科技****
這個不太確抄定,可以配置下:nacl 9.0g吐溫襲-20 5ml加baidw至1000ml該配方中吐溫du-20的濃度是zhi0.
5%,但我看到有的dao資料講吐溫-20的濃度範圍在0.05%-0.2%之間,一般不超過0.
2%,因為高於這個濃度可能引起固相化的抗原或抗體解吸附。僅供參考
tris-hcl 緩衝液與hepes緩衝液區別打嗎
2樓:北京索萊寶科技****
從緩衝液的角度來看,他們對你的蛋白應該沒有什麼影響。不同的是2種緩衝液的緩衝能力回和ph範圍答不一樣,由各自的pka決定的。hepes pka在7.
55,使用範圍ph 6.5-8.5。
tris為弱鹼,在室溫(25°C)下,它的pka為8.1;根據緩衝理論,tris緩衝液的有效緩衝
範圍在ph7.0到9.2之間。需要注意的是溫度對tris buffer的ph影響很大,
tris緩衝液(如10mm ph8.3@25°C)ph對溫度敏感(25°C與72°C差異較大),hepes的ph對溫度基本無變化
乙個是離子緩衝體系,一種是非離子緩衝體系
dna上樣緩衝液和rna上樣緩衝液可以通用麼
3樓:北京索萊寶科技****
dna上樣
緩衝液bai
和rna上樣緩衝液可以du通用。
因為zhidna和rna鏈上的鹼基都基本
dao一致版
。而這兩種上權樣緩衝液中含有的染料是二甲苯青和溴酚藍,都可以與其鹼基結合,跑出條帶。
但是,如果使用dna上樣緩衝液,裡面會夾雜一些rna酶,這些酶有可能會影響到實驗結果。使用前需要將rna酶處理掉。
4×和5×的上樣緩衝液區別
4樓:北京索萊寶科技****
4×和5×的上樣緩衝液的區別就是加樣的比例不一樣。
4×上樣緩衝液使用方法:
1、按每30微公升蛋白樣品加入10微公升上樣緩衝液的比例(4倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高,可用雙蒸水稀釋。
2、混勻後,100°C水浴加熱5-10分鐘,使蛋白變性。
3、冷卻至室溫後,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。
5×上樣緩衝液使用方法:
1. 在室溫或不超過37°C的水浴中溶解sds-page上樣緩衝液(5x)。水浴溶解後立即室溫存放,盡量避免長時間置於水浴中。
2. 按照每4微公升蛋白樣品加入1微公升蛋白上樣緩衝液(5x)的比例,混合蛋白樣品和蛋白上樣緩衝液(5x)。
3. 100°C或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
4. 冷卻到室溫後,直接上樣到sds-page膠加樣孔內即可。
5. 通常電泳至藍色染料到達膠的底端處附近即可停止電泳。
pb緩衝液與pbs的作用有哪些不同
5樓:北京索萊寶科技****
磷酸鹽起著緩衝作用的.而氯化鈉,起著調節滲透壓的作用.一般來說,如果與細胞打交道,應該是pbs.而只是化學反應,可以用pb就行了.
6樓:匿名使用者
兩種緩衝液抄雖然都很常用,但bai是本質上還是有些區別du的。zhipbs 溶液的pka值會隨著緩衝液的稀釋而
dao變化,而且抑制多數酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脫氫酶等。tris 受緩衝液的濃度和使用溫度的影響。可以參與多種酶反應。
磷酸鹽起著緩衝作用的。而氯化鈉,起著調節滲透壓的作用。一般來說,如果與細胞打交道,應該是pbs。而只是化學反應,可以用pb就行了。
pbs是磷酸緩衝鹽溶液(phosphate buffer saline),一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩衝液,主要成分為na2hpo4、kh2po4、nacl和kcl,由於na2hpo4和kh2po4它們有二級解離,緩衝的ph值範圍很廣;而nacl和kcl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要pbs還可以補加1 mmol/lcacl2和0.
5 mmol/lmgcl2,以提供雙價陽離子。 注:pbs不是磷酸緩衝液(phosphate buffer solution,pb)。
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