1樓:南京金益柏生物科技****
小鼠中性粒細胞做ihc,我建議樓主呢,還是查詢文獻,一般文獻講解是比較詳細的,也是比較清楚的。
怎樣分離小鼠外周血中性粒細胞
2樓:風雪中的緣
外周血中單個核細胞和單核細胞,其體積、形態和密度與其他細胞不同。淋巴細胞分離液是一種密度介於1.075∽1.090之間而近似於等滲的溶液。
小鼠mdsc和中性粒細胞怎麼區分
3樓:匿名使用者
中性粒細胞(pmn)是機體防禦系統的主要組成部分,能吞噬和殺滅多種致病原。致病原與血清中的特異性抗體(igg)結合後,通過igg的fc部分與pmn表面的受體——fcγriii(cd16b)相結合,從而被吞噬。fcγriii有a、b兩種型別,fcγriiia(cd16a)是一種跨膜醣蛋白,pmn表面的fcγriiib(cd16b)是一種糖肌醇磷脂蛋白(gpi-錨蛋白)[1]。
近年發現陣發性睡眠性血紅蛋白尿症(pnh)患者在血細胞表面缺失各種特異的gpi-錨蛋白,cd16b正是這類蛋白之一。為**pmn表面cd16b的缺失與pmn釋放氧自由基殺菌功能的關係,將我們的研究報告如下。
材料和方法
1 標本採集 正常人外周血取自****血庫正常獻血者,正常骨髓取自****胸外科手術患者的肋骨,pnh患者按2023年全國溶血性貧血會議擬定的診斷標準,並經流式細胞儀免疫螢光法檢測cd59標記率進一步確診。
2 中性粒細胞的分離 新鮮的外周血或骨髓,用肝素抗凝,經淋巴細胞分離液分離,去除淋巴細胞和單個核細胞,用右旋糖酐(dextran,分子量=7~11 萬) 沉降和低滲法去除紅細胞,得到純淨的中性粒細胞。用台盼藍染色法檢查細胞活力,須保證細胞存活率大於95%。
3 間接免疫螢光法檢測cd16 取1×106個細胞,懸浮於100μl 2% bsa中,室溫封閉30分鐘,加 cd16單轉殖抗體(immunotech sa公司產品),在室溫作用30分鐘後,用pbs洗滌2次,再懸浮於100μl 2%bsa中,加fitc 標記的羊抗鼠igg(gibco公司產品)室溫暗染20分鐘後洗去二抗。用500μl pbs懸浮細胞,用流式細胞儀檢測cd16 標記率。
4 中性粒細胞功能測定 佛波醇酯(pma,sigma產品,用dmso溶解,配製成1mg/ml,儲存於-20°C,臨用前稀釋)能啟用中性粒細胞,使之釋放活性氧,其中o-2*和h2o2能與化學發光劑luminol(3-氨基苯二甲醯肼,北京化工廠)反應而發光。用lkb-1250發光儀(luminometer)檢測。正常人和pnh患者中性粒細胞,製備成細胞懸液(107 /ml)與 100nmol/l pma 反應,37°C15分鐘,置於冰上終止反應,取含1×105 細胞的啟用液加入到1ml 0.
1nmol/l 的luminol 溶液中,立即測定發光值,每一數值測定3次以上, 取平均值。取正常人的不同細胞數,測定發光值,結果顯示發光值與細胞數有良好的線性關係,說明此方法具有可靠性 (附圖)。
附圖 細胞數與發光值的線性關係
5 細胞培養 以 1×106個細胞/ml的密度接種pmn於imdm培養基(含10%自身血清),37°C、5% co2分別培養12,16,20小時。
6 細胞形態學觀察 不同培養時間的細胞用瑞氏染色,光學顯微鏡下觀察。
7 dna含量分析 取細胞1×106,pbs洗2遍,以70%冷乙醇(4°C)固定12小時以上,用pbs洗去乙醇,加入0.5ml檸檬酸-磷酸緩衝液(ph 7.8)室溫作用5分鐘,離心後以pbs重懸細胞,加入 rnasea (終濃度60μg/ml)37°C作用30分鐘,再加入碘化乙錠(pi,終濃度50μg/ml)4°C暗染30分鐘,以染細胞內總dna,用流式細胞儀分析正常細胞和凋亡細胞,計算凋亡率。
外周血中性粒細胞數量變化的臨床意義
4樓:匿名使用者
(1)中性粒細胞增多 見於急**染、嚴重的組織損傷及大量血細胞破壞、急性大出血、急性中毒、白血病、骨髓增殖性疾病及惡性腫瘤。
(2)中性粒細胞減少 見於感染、血液系統疾病、物理化學因素損傷、單核-吞噬細胞系統功能亢進、自身免疫性疾病。
小鼠外周血有哪些血細胞,各有什麼特點
5樓:一生乙個乖雨飛
血細胞包括紅細胞、白細胞和血小板組成。
紅細胞無細胞核,呈雙面凹的圓盤狀,是血細胞中專數量最多的一種,屬白細胞無色,體積比紅細胞大,有細胞核,血小板無核,又稱血栓細胞,由於血小板非常小,從光學顯微鏡下觀察血塗片,不易觀察到,所以沒有細胞核的有紅細胞和血小板。
血細胞約佔血液容積的45%,在正常生理情況下,血細胞和血小板有一定的形態結構,並有相對穩定的數量。
6樓:匿名使用者
有 紅細胞
白細胞 血小板
紅細胞中有少量的網積紅細胞,
白細胞包括有顆粒細胞,淋巴細胞和單核內細容胞.
其 中有顆粒細胞包括嗜酸性粒細胞,嗜鹼性粒細胞和中性粒細胞.其中中性粒細胞佔50-70%,淋巴細胞佔20-30%,單核細胞佔3-8%左右.
什麼是中性粒細胞血液常規檢查
中性粒細胞具趨化作用 吞噬作用和殺菌作用。每微公升血液中約有4500個中性粒細胞。由於這些細胞的細胞核的形態特殊，又稱為多形核白細胞。中性粒細胞在血管內停留的時間平均只有6 8小時，它們很快穿過血管壁進入組織發揮作用，而且進入組織後不再返回血液中來。中性粒細胞在血液的非特異性細胞免疫系統中起著十分重...
白細胞偏低370109l中性粒細胞絕對值偏低
血白細胞數量偏低是抵抗力差 血紅蛋白濃度偏低也沒什麼加強營養,多鍛鍊正常白細胞數為 4 10 109 公升，通俗說就是每立方公釐4000 個，平均值則為7000個。如果介於4000 7000表示正常偏低，不需 如果低於4000個，就可診斷為白細胞減少症。即使如此，也不一定就需要 比如說，僅僅是輕度減...
體檢結果說白細胞,中性粒細胞數偏低,是怎麼回事,我
中性粒細bai胞實際上是白細胞的一種,在du正常zhi人體內佔到了白細dao胞總數的大部分。因此專中性粒細胞偏低,白細胞總屬 數往往也會偏低。白細胞總數偏低,很多原因都有可能造成,例如機體免疫力低下,病毒感染,傷寒,副傷寒,某些自身免疫性疾病,某些毒素中毒,某些血液系統疾病等等,都有可能造成白細胞總...