1樓:匿名使用者
把要收集上清的細胞重新在一次性培養板中培養,如果是貼壁細胞的話,在收集前24小時,改用不完全培養基培養,即用不加血清的培養基。收集的時候,用移液槍吸取上清即可。
求助:怎麼提取細胞上清液中的蛋白
2樓:匿名使用者
怎麼提取細胞上清液中的蛋白 western blot中蛋白樣品調節濃度有很多方法 先檢測出各
個蛋白樣品的濃度,根據體積通過不同單位的loading buffer將樣品稀釋成不同的體積,即可以保證各個蛋白樣品濃度一致 或者在樣品裂解的時候,用裂解液或者pbs去稀釋蛋白樣品,達到調節濃度的。細胞比較簡單,只有細胞膜,抽提過程中,很容易破壞細胞膜,從而得到蛋白,相應蛋白中受到其他物質干擾也比較少,樣品較為乾淨。但是用組織的時候,組織由細胞組成,但是從組織中抽提丹巴就要複雜,做組織勻漿以後,再分離組織碎片和蛋白,但是分離過程可能沒有那麼好,組織中含有的各種雜質,雜蛋白就比細胞中要多,要複雜。
因此選擇適當的方法提取組織蛋白,對於後續的western來說還是非常重要的,這也是為什麼細胞的蛋白做wb挺好,但是換到組織,可能有些條件就需要進一步優化了。
3樓:秋雨梧桐葉落石
要看你細胞培養上清也中的蛋白是否帶有his標籤,或者具有金屬離子結合作用了。
細胞培養上清液是什麼
4樓:孫超
液抄是細胞液
如果你襲對這個答案有什麼疑問,請追問,
另外如果你覺得我的回答對你有所幫助,請千萬別忘記採納喲!
細胞培養上清液是紅色的,elisa試劑盒可以檢測嗎
5樓:森貝伽生物科技
可以,細胞培養上清樣本處理:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用pbs(ph7.2-7.
4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反覆凍融,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清。儲存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
6樓:南京金益柏生物科技****
可以檢測的,畢竟elisa試劑盒檢測的種屬還是比較多的哈
7樓:
可以、的
外泌型蛋白可以檢測
請教收集細胞培養上清液的方法
8樓:北京索萊寶科技****
把要收集上清的細胞重新在一次性培養板中培養,如果是貼壁細胞的話,在收集前24小時,改用不完全培養基培養,即用不加血清的培養基。收集的時候,用移液槍吸取上清即可。
請問收集細胞上清液的細胞是不是要用無酚紅的培養基培養呢?謝謝!
9樓:匿名使用者
不是的,用不用酚紅培養基都沒關係的
10樓:匿名使用者
這個要看你蒐集的上清液是幹什麼用的。如果下游的試驗可能受到酚紅的影響,就不要用。不然,沒有區別。
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