細胞內dna複製的引物與pcr引物有何區別

1樓:匿名使用者

【相同點】:

1. 都以dna為模板

2. 都以四種dntp為底物

3. 都要dna聚合酶

4.都需要mg2+

5. 都需要解開雙鏈為2條單鏈

6. 都沿著5『-3』方向聚合

【不同點】:

1. pcr是dna複製的體外擴增技術

2. 體內dna複製半不連續複製,體外pcr連續複製,不產生岡崎片段。

3. 體內dna複製是8種酶和蛋白共同參與(dnab,引物酶,rep蛋白,ssb蛋白,dna旋轉酶,dna聚合酶3,dna聚合酶1,連線酶),體內dna複製的聚合酶在高溫時會變性,pcr需要耐熱的dna聚合酶(常用taqdna聚合酶)。

4. 生物體內dna複製需要生物體自身的複製,pcr需要經過高溫變性,低溫退火和中溫延伸過程,要經歷三十次迴圈使特定dn**段放大數百萬倍。

5. dna複製需要校對以保證忠實性,pcr不需要校對。

6. 引物不同:體內dna複製需要rna,而且體內引物要除去,pcr需要兩個人工合成的dna引物,不需要切除。

7. pcr對dna模板要求不高,純度要求不嚴格,用量很低,但是引物的設計十分重要,決定了pcr擴增片段的大小和特異性。

pcr引物是什麼?

2樓:點點星光帶晨風

聚合酶鏈式反應簡稱pcr(polymerase chain reaction) (又稱:多聚酶鏈式反應) pcr是體外酶促合成特異dn**段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復性)及適溫延伸等反應組成乙個週期,迴圈進行,使目的dna得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。

它不僅可用於基因分離、轉殖和核酸序列分析等基礎研究,還可用於疾病的診斷或任何有dna,rna的地方。pcr又稱無細胞分子轉殖或特異性dna序列體外引物定向酶促擴增技術。

3樓:暴走少女

pcr引物又稱為寡核苷酸引物,也就是rna,是由人工合成的,分為兩種,引物1和引物2。由於dna聚合酶只能從核苷酸鏈的5'端到3'端進行複製,也就是只能識別3'的尾端。

而且只能把核苷酸連到已經和dna模板互補產生的多核苷酸鏈上,所以引物1和2分別於雙鏈dna的兩條鏈的尾部(就是末尾是3'端的那一邊)結合,為那些脫氧核苷酸提供3'的末端,就相當於開了個頭。然後在dna聚合酶的作用下合成兩條新鏈。而那段引物就成了新鏈的一部分。

4樓:白色的妖精

通俗的講,引物就是為了增幅目的dna而匯入的短小dn**斷,在pcr反應中,新合成的dna是要接在引物上才能繼續按照模版dna複製。引物的設計因需要增幅的序列而不同。舉個例子來說,你要增幅如下序列:

accctcccgccccccccgtat

(互補鹼基不寫了)

那麼一般來說,你就要匯入以accctc結尾的引物使得增幅繼續下去,具體方法和注意事項樓主可以看gee_an大俠的資料。

查了一下測序公司的網頁,如果要同定微生物,樓主需要準備如下東東:

1、待測菌體。試管或培養皿都可以,但必須是純粹的待測菌體,不能含有其他的微生物。

2、提純的dna。如果1有致病性或傳染性,那麼樓主就得自己提純dna再交給測序公司。dna純度要求可以做pcr。

ps:很佩服樓主充足的經費,我們這裡同定一次要2800人民幣......

5樓:匿名使用者

pcr的目的是大量擴增你所需要的片斷。換句話說,就是用人工的方法大量複製dna。而dna的複製是以一條鏈為模板,新合成鏈按照鹼基互補配對進行的。

可是有乙個問題,dna的合成必須是前端有一小段序列,他接著這段序列合成,而不能從無到有,憑空合成。它前面這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是dna也可以是rna,一般20多bp.

需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物