將重組dna匯入細胞內有哪些方法?它們的原理是什麼?
1樓:愛是錯怪
(1)將重組質粒匯入原核細胞稱轉化,通常用氯化鈣法使大腸桿菌細胞處於感受態,從而將外源dna匯入細胞。另乙個常用方法是用脈衝高壓電瞬間處理,使外源dna高效匯入細胞,稱為電穿孔法。
2)將重組體dna包裝成噬菌體,使外源基因匯入宿主細胞稱轉導,在適宜條件下使轉化率提高。
3)將外源基因匯入動物細胞常用方法有磷酸鈣轉染技術,電穿孔轉染技術,脂質體載體法,deae-葡聚醣轉染技術,顯微注射法等。將外源基因匯入植物細胞常用方法是用ti質粒將外源基因匯入植物的外植體,也可將植物細胞的細胞壁消化,再用將外源基因匯入動物細胞常用方法將外源基因匯入原生質體,再誘導產生細胞壁。還有乙個方法,是用基因槍將外源dna射入植物組織或細胞。
2樓:匿名使用者
將外源基因送入受體細胞,需要運載體,目前常用的運載體一般有質粒,噬菌體和動植物病毒。通過細菌或病毒的侵染來將目的基因送入受體細胞內。
3樓:佴聽聞
首先區分概念 dna重組藥物是基因藥物中的乙個類別 也就是說 dna重組藥物是屬於基因藥物的 其次,這兩種藥物多是由經過遺傳物質改變的微生物合成的,二者的根本區別在於dna重組藥物裡的遺傳物質改變(包。
重組dna分子匯入受體細胞的主要方法有哪些
4樓:墨汁諾
(1)農桿菌轉化法:
農桿菌是土壤中的一種微生物,在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物,對大多數單子葉植物沒有感染能力。農桿菌進入植物細胞後,其ti質粒上的t-dna會轉移到受體細胞染色體的dna上,目的基因進入植物細胞。
2)花粉管通道法:
在授粉後向子房注射含目的基因的dna溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源dna匯入受精卵細胞,並進一步地被整合到受體細胞的基因組中,隨著受精卵的發育而成為帶轉基因的新個體。
3)基因槍法:
基因槍根據動力系統可分為火藥引爆、高壓放電和壓縮氣體驅動三類。其基本原理是通過動力系統將帶有基因的金屬顆粒(金粒或鎢粒),將dna吸附在表面,以一定的速度射進植物細胞,由於小顆粒穿透力強,故不需除去細胞壁和細胞膜而進入基因組,從而實現穩定轉化的目的。
原理:
選擇一種特製的空質粒載體(如pbi121質粒載體),其上要求含有t-dna邊界序列(此處可參見詞條雙元表達載體系統),在序列之間含有複製原點、抗性基因、gus報告基因、hind ⅲ和bamh i 等酶切位點(以上這些構成了乙個t-dna區)。
先通過雙酶切反應酶切空質粒載體和目的基因,再通過酶連反應連線空質粒載體和目的基因,從而構建成完整的重組質粒。此時重組質粒的t-dna區包括t-dna邊界序列、複製原點、突變啟動子片段、gus報告基因、抗性基因。
5樓:匿名使用者
進行轉化。構建好的載體,進行基因槍轟擊、農桿菌介導等方法,進入到植物或動物細胞中。
dna重組技術是怎樣的原理
6樓:惠連枝弭茶
dna體外重組技術基本原理就是將兩種dna分子通過限制性內切酶和連線酶拼接到一起發揮作用。基本過程包括:獲得目的基因;將目的基因進行必要的加工和處理並與載體dna連線;將重組dna引入宿主細胞;篩選與鑑定重組體轉殖;表達目的基因產物及產物純化。
7樓:路戍人
基因工程是利用重組技術,在體外通過人工「剪下」和「拼接」等方法,對各種生物的核酸(基因)進行改造和重新組合,然後匯入微生物或真核細胞內,使重組基因在細胞內表達,產生出人類需要的基因產物,或者改造、創造新特性的生物型別。
從實質上講,基因工程的定義強調了外源dna分子的新組合被引入到一種新的寄主生物中進行繁殖。這種dna分子的新組合是按工程學的方法進行設計和操作的,這就賦予基因工程跨越天然物種屏障的能力,克服了固有的生物種(species)間限制,擴大和帶來了定向改造生物的可能性,這是基因工程的最大特點。
基因工程包括把來自不同生物的基因同有自主複製能力的載體dna在體外人工連線,構成新的重組的dna,然後送到受體生物中去表達,從而產生遺傳物質的轉移和重新組合。
基因工程要素:包括外源dna,載體分子,工具酶和受體細胞等。
細胞內組成DNA的五碳糖是,細胞內組成DNA的五碳糖是( )A 核醣B 葡萄糖C 脫氧核醣D 麥芽
dna裡的五碳糖是 脫氧核醣 結構式如下 從左到右分別為 d 2 脫氧核醣 d 2 脫氧核醣 d 2 脫氧核醣 答案 c 答案解析 試題分析 dna的基本單位是脫氧核醣核苷酸,有磷酸 脫氧核醣和含氮鹼基構成,其中脫氧核醣是五碳糖,故選c 核醣是構成rna的基本組成成分 考點 dna的基本組成單位 點...
細胞內dna複製的引物與pcr引物有何區別
相同點 1.都以dna為模板 2.都以四種dntp為底物 3.都要dna聚合酶 4.都需要mg2 5.都需要解開雙鏈為2條單鏈 6.都沿著5 3 方向聚合 不同點 1.pcr是dna複製的體外擴增技術 2.體內dna複製半不連續複製,體外pcr連續複製,不產生岡崎片段。3.體內dna複製是8種酶和蛋...
下列與真核細胞內DNA複製 轉錄和翻譯的相關敘述,正確的是
a dna複製只發生在能bai進行 du的細胞中,轉錄和翻 zhi譯幾乎能在所dao有活細胞中進行,內a錯誤 b mrna和trna分子的大小無法比較容,b錯誤 c 轉錄的模板是dna分子的一條鏈,而dna複製的模板是dna分子的兩條鏈,c錯誤 d 核醣體能與mrna結合並進行翻譯過程,因此核醣體存...