1樓:水果和沙拉
化合物的螢光光譜與分子結構的哪些因素有關
最強且最有用的螢光物質多專
是具有較低能量屬差的π→π*躍遷產生的,即螢光物質分子中一定具有共軛雙鍵這樣的強吸收結構.幾乎所有分析化學有用的螢光體系都含有乙個以上的芳香基:如羅丹明b,8-羥基喹啉,桑色素.
影響物質螢光強弱的主要結構因素:
1、躍遷型別
π→π*躍遷是產生螢光的主要躍遷型別,所以絕大多數能產生螢光的物質都含有芳香環或雜環.
2、體系的共軛度增加,螢光效率一般也將增大.
3、螢光效率高的物質,其分子多是平面構型,且具有一定的剛性.
4、取代基效應.芳烴和雜環化合物的螢光光譜和螢光強度常隨取代基而改變.
如取代基存在,π電子的電子雲與芳環上π電子能共平面,能擴大π電子共軛程度,可使螢光增強.
一般說來,給電子取代基如-oh,-nh2,-or,-nr2等能增強螢光;而吸電子取代基如-no2,-cooh,-c=o,鹵素離子等使螢光減弱.
簡述研究小分子與蛋白相互作用的方法有哪些
2樓:匿名使用者
研究dna-蛋白質相互作用的實驗
方法主要包括:a、凝膠阻滯實驗; b、dnase 1 足跡實驗;c、甲基化干擾實驗; d、體內足跡實驗; f、拉下實驗。研究蛋白質/ 核酸相互作用近期採用的新技術有:
核酸適體技術、生物資訊學方法、蛋白質晶元技術以及奈米技術等。
蛋白(綠色螢光蛋白或紅色螢光蛋白)的載體中,共轉染到功能細胞中(一般選用 cos7 細胞)表達帶有螢光的融合蛋白.這樣,相互作用的兩種蛋白就被標上不同的螢光,可以在細胞內用螢光顯微鏡直接觀測.在進行精確細胞定位或共定位時,必須用共聚焦螢光顯微鏡觀測.
因為共聚焦螢光顯微鏡(相當於醫院給病人診斷的 ct)觀測的是細胞內乙個切面上的顏色.如果在乙個切面上在同一區域看到兩種顏色,就提示這兩種蛋白在該區域內有相互作用.普通螢光顯微鏡看到的是乙個立體圖象,無法確定蛋白質共定位現象.
在進行定位或共定位同時,也可以對細胞核進行染色.這樣,在細胞中就有三種顏色.細胞核的顯色幫助你確定共定位發生的位置.
上面介紹的活細胞定位,其優點是表達的螢光蛋白螢光強,沒有背景,觀測方便.
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