1樓:思朗
直接從生物組織中提取的dna的量一般都是很少的,所以需要pcr進行擴增,使其達到一定的濃度,才方便進行下一步的操作。
pcr為什麼是第三輪才獲得目的基因 20
2樓:南瓜蘋果
原因如下:
一般需要獲得的基因是有一定長度的,而模板長度很長。設計的引物決定了擴增產物的長度。第乙個迴圈,引物與模板互補,此時變成兩個模板,但因為模板很長,沒有什麼終止擴增,所以第乙個迴圈擴增出來的新片段很長很長。
第二個迴圈以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第二個迴圈得到的片段就是我們需要的長度,但只是一條鏈,所以還不能分離出目的基因。
第三個迴圈:當以第二個迴圈得到的新片段為模板時,因為這個片段的長度就是需要擴增的長度,所以當第三個迴圈完成時,這個片段是需要的長度,且是雙鏈dna,這就得到了需要的目的基因了。所以至少要3個迴圈才能分離出目的基因。
擴充套件資料
pcr的每個迴圈過程包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個不同的事件:
1變性:加熱使模板dna在高溫下(94°C左右)雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈;
2退火;使溶液溫度降至50~60°C,模板dna與引物按鹼基配對原則互補結合;
3延伸:溶液反應溫度公升至72°C,耐熱dna聚合酶以單鏈dna為模板,在引物的引導下,利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸(dntp),按5'一3』方向複製出互補dna。
3樓:匿名使用者
因為前兩輪迴圈擴增產物上目的基因上都帶有模板dna其他片段,即擴增產物比目的基因的dn**段長,第三輪就有了純目的基因片段了。附件是pcr過程的flash動畫,看看就明白了。
4樓:天涯戎馬
第一輪起始變性,模板dna完全解鏈
第二輪,上游引物與模板dna結合位點結合開始複製,直至模板鏈末端,注意,這次的產物包含了目的dna以及下游的一部分
第三輪,下游引物與第二輪的產物結合,向與第二輪複製相反的方向複製,得到了目的dna。
在以後的複製中,若以前面的目的基因產物為模板的話,一輪就得到新的目的dna了,並不是所有的都需經過三輪
5樓:貓哭耗子
不明白第三輪是什麼意思 一般25-35個迴圈才獲得目的基因啊,高溫變性、低溫退火和適溫延伸,為乙個迴圈!
pcr擴增目的基因時為什麼要冷卻
6樓:匿名使用者
冷卻的時候才能使得引物和模板結合啊。這一步也叫退火。
為什麼要進行目的基因的擴增
7樓:青陽燦
基因擴增的目的有很多。較常見的有做基因測序,轉化,構建重組質粒等基因水平的操作
8樓:匿名使用者
為了增加目的基因整合進目標染色體的概率
超弱智的問題,pcr擴增產物長度是指目的基因的擴增長度還是指什麼?為什麼目的基因有700多,擴增產物長度
9樓:愛是地獄
pcr是擴增數目的。
目的基因有700多,擴增產物長度只有200. 這個就是引物選擇的問題了。引物決定了擴增的起始位置,如果你選擇的引物正好是500以後的位置,那麼擴增產物長度就只有200了。
10樓:匿名使用者
擴增產物長度是指你兩個引物對應位點之間的長度。如果這個長度是700,你的擴增產物只有200,那就是非特異性擴增產物,不是你要的目的基因。
11樓:匿名使用者
很可能是引物特異性的問題,一方面查查引物的屬性,一方面公升高溫度(可以提高引物特異性)試試
pcr技術擴增得到目的基因計算公式
12樓:匿名使用者
擴增了5次,來得到了22個目自
的基因,是指的22個拷貝嗎?
樓上兩位說的都是在理想狀態。實際反應的效率沒有100%。也就是說100個目的基因,乙個迴圈其實並不能產生200個產物,如果效率是90%,那就產生180個。
不過在理解pcr原理的時候,一般還是考慮理想狀態下。所以你那個5次得到22個拷貝,肯定是不對的。
13樓:麻麻
我是抄ls小號,度娘審核答案
你看這個襲圖,不就是在一段dna上截嗎?
就是說複製出的dna雙鏈中有的不是目的基因, 這句話我不太懂。在不考慮dna外顯子和內含子以及複製時出現的染色體變異等等情況下,一模一樣的dna為什麼會有不同的基因?
額,因為這部分是選修,我們只學了基礎理論。。。
14樓:匿名使用者
和dna複製一樣的吧~ 2^n
擴增5次得到23條
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