1樓:匿名使用者
1:密度梯度離心中單一樣品組份的分離是借助於混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的;差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離
2:密度梯度離心只用乙個離心轉速,而差速離心用兩個甚至更多的轉速。
3:密度梯度離心的物質是密度有一定差異的,而差速離心是適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分
我也就知道這些,不知道是否有用!!!
差速離心法和密度梯度離心法的區別
2樓:甜小糖
區別一:定義不同
差速離心法:差速離心主要是採取逐漸提高離心速度的方法分離不同大小的細胞器。起始的離心速度較低,讓較大的顆粒沉降到管底,小的顆粒仍然懸浮在上清液中。
收集沉澱,改用較高的離心速度離心懸浮液,將較小的顆粒沉降,以此類推,達到分離不同大小顆粒的目的。
密度梯度離心法:用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。
區別二:原理不同
差速離心法:物體圍繞中心軸旋轉時會受到離心力f的作用。當物體的質量為 m、體積為v、密度為d、旋轉半徑為r、角速度為(弧度數/秒)時,可得:
f=mω2r 或者 f=v.d.ω2r 。
密度梯度離心法:不同顆粒之間存在沉降係數差時,在一定離心力作用下,顆粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同區域上形成區帶的方法。
區別三:轉速不同
差速離心法:用多個離心轉速。
密度梯度離心法:只用乙個離心轉速。
區別四:密度不同
差速離心法:是適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分。
密度梯度離心:用此方法的物質密度有一定差異的。
3樓:從小就愛玩
差速離心法,這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開!而密度梯度離心則是較為精細的分離手段,這種方法的關鍵是先在離心管中製備出蔗糖或氯化銫等介質的濃度梯度並將細胞勻漿裝在最上層,密度梯度的介質可以穩定沉澱成分,防止對流混合,在此條件下離心,細胞不同組分將以不同速率沉降並形成不同沉降帶。
4樓:yn桃李醉春風
一、密度梯度離心法和差速離心法的區別
1. 差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離,密度梯度離心中單一樣品組份的分離是借助於混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的。
2. 差速離心用兩個甚至更多的轉速,而密度梯度離心只用乙個離心轉速。
3. 差速離心是適用於混合樣品中各沉降係數差別較大的組分,而密度梯度離心的物質是密度有一定差異的。
二、差速離心法
差速離心法是交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分的分離。
1. 沉降係數
使用離心法時,大分子沉降速度的量度,等於每單位離心場的速度。或 s=v/ω2r,s 是沉降係數, ω 是離心轉子的角速度(弧度 / 秒), r 是到旋轉中心的距離, v 是沉降速度。沉降係數以每單位重力的沉降時間表示,並且通常為 1 ~ 200×10-13 秒範圍, 10-13 這個因子叫做沉降單位 s ,即 1s=10-13 秒,如血紅蛋白的沉降係數約為 4×10 -13 秒或 4s 。
大多數蛋白質和核酸的沉降係數在 4s 和 40s 之間,核醣體及其亞基在 30s 和 80s 之間,多核醣體在 100s 以上。
2. 差速離心法的優缺點
差速離心法的優點是樣品的處理量較大,可用於大量樣品的初分離。其缺點是分離複雜樣品和要求分離純度較高時,離心次數多,操作繁雜。由於沉澱的多次清洗、溶解、再沉澱,容易引起中間損失,所以離心分辨力差。
實際分離時由於離心時的對流、擴散和收取沉澱時的汙染,對於一些沉降係數相差不大的組分無法進行完全的分離提純。產品的純度和**率都達不到上述理論值。因此差速離心法主要用於大量樣品的初步分離提純。
三、密度梯度離心法
密度梯度離心法又稱為區帶離心法,是將樣品加在惰性梯度介質中進行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。
1. 分類
( 1 )差速區帶離心法:分離密度相差不大、重量和大小區分較大的樣品。 將樣品置於平緩的預先製好的密度梯度介質上,進行離心,較大的顆粒將比較小的顆粒更快地沉降。
通過梯度介質,形成幾個明顯的區帶(條帶)。這種方法有時間限制,在任一區帶到達管底之前必須停止離心。大小相同、密度不同的顆粒(如溶酶體、線粒體和過氧化物酶體)不能用本法分離。
( 2 )等密度區帶離心法:用於樣品顆粒的浮力密度差,密度差越大的樣品分離效果越好,與顆粒大小和形狀無關。離心管中預先放置好梯度介質,樣品加在梯度液面上,或樣品預先與梯度介質溶液混合後裝入離心管,通過離心形成梯度。
離心時,樣品的不同顆粒向上浮起,一直移動到與它們的密度相等的等密度點的特定梯度位置上,形成幾條不同的區帶,這就是等密度離心法。離心所需時間以最小顆粒到達等密度點(即平衡點)的時間為基準,有時長達數日。
等密度區帶離心法所用的梯度介質通常為氯化銫 c s cl ,其密度可達 1.7 g/cm3 。此法可分離核酸、亞細胞器等,也可以分離復合蛋白質,但簡單蛋白質不適用。
2. 密度梯度離心法的優缺點
優點是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應範圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降係數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;③顆粒不會擠壓變形,能保持顆粒活性。
缺點是:①離心時間較長;②需要製備惰性梯度介質溶液;③操作嚴格,不易掌握。
5樓:匿名使用者
差速離心是每次用不同的轉速將混在一起但是比重不同的結構或物質分開(某速度離心一次分離出乙個),比如細胞器的分離;
密度梯度離心一般是一次離心讓混合物中比重不同的分成不同的層。比如dna半保留複製的實驗證據就是用這個方法
6樓:華
區別在於差速利用速度不同,而密度利用比重。
差速離心是每次用不同的轉速將混在一起但是比重不同的結構或物質分開(某速度離心一次分離出乙個),比如細胞器的分離;
密度梯度離心一般是一次離心讓混合物中比重不同的分成不同的層。
7樓:風辰平
兩者都是依靠離心力對細胞勻漿懸浮扔中的顆粒進行分離的技術.差速離心是一種較為簡便的分離法,常用於細胞核和細胞器的分離.因為在密度均一的介質中
高手總結下高中生物差速離心法和密度梯度離心法分別用於什麼?具體~如製備細胞膜
8樓:匿名使用者
差速離心法(離心法):交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法.此法適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分的分離.
梯度離心法(濃度梯度):細胞內的物質具有一定的濃度,把細胞放入清水中,細胞吸水漲破.除去細胞內的其他物質,得到細胞膜.
差速離心法的密度梯度離心法和差速離心法
9樓:手機使用者
1:密度梯度離心中單一樣品組份的分離是借助於混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達到的;差速離心法是用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離
2:密度梯度離心只用乙個離心轉速,而差速離心用兩個甚至更多的轉速。
3:密度梯度離心的物質是密度有一定差異的,而差速離心是適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分
生物中離心法和差速離心法的實驗有什麼差別
10樓:絔依渃雪
如果不特別說明,離心一般是在一定的轉速下進行一段時間,將要分離的東西分開.
而差速離心則是用一定的轉速將物質分成兩部分後,將上清液再用更高的轉速離心,分成層後如果需要還要用更高的轉速再將上清液離心,直到將物質完全分成不同的層次為止.是交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分的分離。
使用離心法時,大分子沉降速度的量度,等於每單位離心場的速度。或s=v/ω2r。s是沉降係數,ω是離心轉子的角速度(弧度/秒),r是到旋轉中心的距離,v是沉降速度。
沉降係數以每單位重力的沉降時間表示,並且通常為1~200×10-13秒範圍,10-13這個因子叫做沉降單位s,即1s=10-13秒,如血紅蛋白的沉降係數約為4×10-13秒或4s。大多數蛋白質和核酸的沉降係數在4s和40s之間,核醣體及其亞基在30s和80s之間,多核醣體在100s以上。
11樓:_侵城
離心一般是在一定的轉速下進行一段時間,將要分離的東西分開。
而差速離心則是用一定的轉速將物質分成兩部分後,將上清液再用更高的轉速離心,分成層後如果需要還要用更高的轉速再將上清液離心,直到將物質完全分成不同的層次為止.是交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分的分離。
使用離心法時,大分子沉降速度的量度,等於每單位離心場的速度。或s=v/ω2r。s是沉降係數,ω是離心轉子的角速度(弧度/秒),r是到旋轉中心的距離,v是沉降速度。
沉降係數以每單位重力的沉降時間表示,並且通常為1~200×10-13秒範圍。
10-13這個因子叫做沉降單位s,即1s=10-13秒,如血紅蛋白的沉降係數約為4×10-13秒或4s。大多數蛋白質和核酸的沉降係數在4s和40s之間,核醣體及其亞基在30s和80s之間,多核醣體在100s以上。
通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配製成1~2毫公升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降係數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。
測定原理
沉降係數的測定原理就是在恆定的離心力場下測定樣品顆粒的沉降速度。
因為樣品顆粒很小,不能直接看到它們的沉降運動,所以把離心時樣品顆粒的介面移動速度看作是樣品顆粒的平均沉降速度。通常使用schlieren和吸收光學系統來記錄介面沉降圖。在沉降圖中樣品介面一般表現為乙個對稱的峰,峰的最高點代表介面位置。
通常沉降係數測量精度為±2%,但是如果麵界圖型表現為不對稱峰型,或希望沉降係數測量精度達到±1%或更小的情況時,按峰的最高點作為介面位置就不夠了這時應該使用二階距法計算介面位置。
12樓:
離心技術包括:1.差速離
心法,差速離心法是交替使用低速和高速離心,用不同強度的離心力使具有不同質量的物質分級分離的方法。此法適用於混合樣品中各沉降係數差別較大組分的分離。
2.密度梯度離心法,用超離心機對小分子物質溶液,長時間加乙個離心力場達到沉降平衡,在沉降池內從液面到底部出現一定的密度梯度。