1樓：小瓶蓋尜尜
測試過室溫7天的，可以提取出dna，再長未測
什麼是基因二代測序？
2樓：二凡的kiki妍
第二代測序為高通量測序，採用微珠或高密度晶元邊合成邊測序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次獲得數g資料，相對與第三代，都仍然需要擴增的方法放大訊號，擴增後再檢測。
第一代測序技術的主要特點是測序讀長可達1000bp，準確性高達99.999%，但其測序成本高，通量低等方面的缺點，嚴重影響了其真正大規模的應用。因而第一代測序技術並不是最理想的測序方法。
經過不斷的技術開發和改進，以roche公司的454技術、illumina公司的solexa，hiseq技術和abi公司的solid技術為標記的第二代測序技術誕生了。
第二代測序技術大大降低了測序成本的同時，還大幅提高了測序速度，並且保持了高準確性，以前完成乙個人類基因組的測序需要3年時間，而使用二代測序技術則僅僅需要1周，但在序列讀長方面比起第一代測序技術則要短很多。
1）測序文庫的構建（library construction）
首先準備基因組（雖然測序公司要求樣品量要達到200ng，但是gnome analyzer系統所需的樣品量可低至100ng,能應用在很多樣品有限的實驗中），然後將dna隨機片段化成幾百鹼基或更短的小片段，並在兩頭加上特定的接頭（adaptor）。如果是轉錄組測序，則文庫的構建要相對麻煩些，rn**段化之後需反轉成cdna，然後加上接頭，或者先將rna反轉成cdna，然後再片段化並加上接頭。片段的大小（insert size）對於後面的資料分析有影響，可根據需要來選擇。
對於基因組測序來說，通常會選擇幾種不同的insert size，以便在組裝（assembly）的時候獲得更多的資訊。
2）錨定橋接（su***ce attachment and bridge amplification）
solexa測序的反應在叫做flow cell的玻璃管中進行，flow cell又被細分成8個lane，每個lane的內表面有無數的被固定的單鏈接頭。上述步驟得到的帶接頭的dna 片段變性成單鏈後與測序通道上的接頭引物結合形成橋狀結構，以供後續的預擴增使用。
3）預擴增（denaturation and complete amplification）
新增未標記的dntp 和普通taq 酶進行固相橋式pcr 擴增，單鏈橋型待測片段被擴增成為雙鏈橋型片段。通過變性，釋放出互補的單鏈，錨定到附近的固相表面。通過不斷迴圈，將會在flow cell 的固相表面上獲得上百萬條成簇分布的雙鏈待測片段。
4）單鹼基延伸測序（single base extension and sequencing）
在測序的flow cell中加入四種螢光標記的dntp 、dna聚合酶以及接頭引物進行擴增，在每乙個測序簇延伸互補鏈時，每加入乙個被螢光標記的dntp就能釋放出相對應的螢光，測序儀通過捕獲螢光訊號，並通過計算機軟體將光訊號轉化為測序峰，從而獲得待測片段的序列資訊。從螢光訊號獲取待測片段的序列資訊的過程叫做base calling，illumina公司base calling所用的軟體是illumina』s genome analyzer sequencing control software and pipeline analysis software。讀長會受到多個引起訊號衰減的因素所影響，如螢光標記的不完全切割。
隨著讀長的增加，錯誤率也會隨之上公升。
5）資料分析（data analyzing）
這一步嚴格來講不能算作測序操作流程的一部分，但是只有通過這一步前面的工作才顯得有意義。測序得到的原始資料是長度只有幾十個鹼基的序列，要通過生物資訊學工具將這些短的序列組裝成長的contigs甚至是整個基因組的框架，或者把這些序列比對到已有的基因組或者相近物種基因組序列上，並進一步分析得到有生物學意義的結果。
3樓：贊的都帥
即第二代dna測序技術。
dna測序(dna sequencing)作為一種重要的實驗技術，在生物學研究中有著廣泛的應用。早在dna雙螺旋結構(watson and crick,1953)被發現後不久就有人報道過dna測序技術，但是當時的操作流程複雜，沒能形成規模。隨後在2023年sanger發明了具有里程碑意義的末端終止測序法，同年a.
m.maxam和w.gilbert發明了化學降解法。
sanger法因為既簡便又快速，並經過後續的不斷改良，成為了迄今為止dna測序的主流。
然而隨著科學的發展，傳統的sanger測序已經不能完全滿足研究的需要，對模式生物進行基因組重測序以及對一些非模式生物的基因組測序，都需要費用更低、通量更高、速度更快的測序技術，第二代測序技術(next-generation sequencing)應運而生。
這三個技術平台各有優點，454 flx的測序片段比較長，高質量的讀長(read)能達到400bp;solexa測序價效比最高，不僅機器的售價比其他兩種低，而且執行成本也低，在資料量相同的情況下，成本只有454測序的1/10;solid測序的準確度高，原始鹼基資料的準確度大於99.94%，而在15x覆蓋率時的準確度可以達到99.999%，是目前第二代測序技術中準確度最高的。
基因測序是一種新型基因檢測技術，能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列，**罹患多種疾病的可能性，個體的行為特徵及行為合理。基因測序技術能鎖定個人病變基因，提前預防和**。
基因測序相關產品和技術已由實驗室研究演變到臨床使用，可以說基因測序技術，是下乙個改變世界的技術
4樓：匿名使用者
二代測序：將基因組dna打碎成約100-200個鹼基的小片段，在片段的兩個末端加上接頭 ( adapter )。將dn**段變成單鏈後通過接頭與晶元表面的引物鹼基互補而使一端被固定在晶元上。
另外一端隨機和附近的另外乙個引物互補，也被固定住，形成橋狀結構。通過30輪擴增反應，每個單分子被擴增大約1000 倍，成為單轉殖的dna簇，隨後將dna 簇線性化。在下一步合成反應中，加入改造過的dna聚合酶和帶有4種螢光標記的dntp。
在dna合成時，每乙個核苷酸加到引物末端時都會釋放出焦磷酸鹽，激發生物發光蛋白發出螢光。用雷射掃瞄反應板表面，在讀取每條模板序列第一輪反應所聚合上去的核苷酸種類後，將這些螢光基團化學切割，恢復3』端黏性，隨後新增第二個核苷酸。如此重複直到每條模板序列都完全被聚合為雙鏈。
這樣，統計每輪收集到的螢光訊號結果， 就可以得知每個模板dn**段的序列。（中源-協-和-基-因）
5樓：dotaer嘯塵
全基因組重測序（whole genome sequencing)）是利用高通量測序平台對已知基因組序列物種的不同個體或群體的基因組進行重測序，並在此基礎上對個體或群體進行差異性分析。
針對染色體大規模結構變異引起的遺傳疾病，利用低覆蓋全基因組測序結合高效的計算分析手段即可解決 。同時，利用低覆蓋全基因組測序技術，還可以對大規模人群連鎖、關聯進行研究。極少數遺傳疾病由編碼蛋白質區域以外的小變異造成。
這類變異只能使用高覆蓋度全基因組測序檢測。euler使用改進的建庫技術進行全基因組測序，提高覆蓋度、均一性、轉化速率等重要指標。通過自主研發的資訊分析管線，全面分析可能的遺傳變異。
案例分析
臨床案例---地中海貧血症
收樣要求
● 樣本型別：外周血，血漿，ffpe。
● 抗凝劑：枸櫞酸鈉或edta，不能用肝素。
● 採用常規edta抗凝採血管採集的靜脈血≥6ml，可在4℃下暫時儲存及運轉，應當自離體後8小時內完成血漿分離。
● 採用專用血漿儲存管（如streck管）採集的靜脈血≥6ml，可在室溫下暫時儲存及運轉，應當自離體後72小時內完成血漿分離。
● 分離的血漿樣本≥2ml，直接儲存於-80°c 冰箱，在幹冰冷鏈狀態下暫時儲存及運轉。
血清和正常的全血放在採血管中能分清那管是血清那管是全血嗎
就是就是含有不同的促凝劑或是抗凝劑國際分類 黃頭管 內含惰性分離膠 促凝劑，製備標本為血清。惰性分離膠的比重大於血清而小於血凝塊，離心後膠體移動至採血管中間，隔離血塊和血清，便於直接上機和標本的儲存，並保證了一些敏感指標的穩定性 如血糖 電解質 酶類等 提高了檢測結果的準確性。黃頭管用於臨床生化 免...
保護血管的食物有哪些，能保護血管的食物有哪些？
保護血管應該吃什麼食物呢？八種食物可保護血管 玉公尺 有助於人體脂肪及膽固醇的正常代謝，可以減少膽固醇在血管中的沉積，從而軟化動脈血管。西紅柿 含維生素一蘆丁，可提高機體氧化能力，消除自由基等體內垃圾，有預防血栓形成的作用。蘋果 蘋果富含多糖果酸及類黃酮 鉀及維生素e和c等營養成分，對推遲和預防動脈...
鴿子的血能生吃嗎，鴿子的血能生吃嗎？
血液的營養環境很適合細菌或 病毒生存，而病毒有乙個最大的特徵就是離開活細胞後變為結晶 專體，屬暫時失去活性，但是一但接觸到活體細胞它又會恢復活性，繼而對細胞產生危害。這樣看來，血不是該不該吃的問題，而是要如何吃的問題。小建議之一 陌生種類和不明 的動物血最好別吃 小建議之二 在加工過程中，一定要保證...