1樓:匿名使用者
t載體有很多種,甚至有些實驗室直接把表達載體做成t載體的形式。但通常說的t載體就是特指ta轉殖中間載體,比如很多實驗室使用的puc系列載體就屬於這一類。
t載體轉殖的實驗原理
t載體是什麼?
2樓:匿名使用者
一段線性雙鏈dna載體,載體的
兩端3『末端各有乙個額外的t。因為大部分taq聚合酶會在內pcr產物3』末容端新增乙個額外的a,所以使用t載體可以比較方便且高效(相對於平末端)進行pcr產物的連線反應,以方便轉殖的構建或檢測。
3樓:箱子太沉
不是t噬菌體,你錯了,t載體是一種質粒載體
4樓:夜遊紅樓
t型別噬菌體,可以用它作為載體將目的基因匯入細菌。
5樓:實茂孟爾白
空的dna質粒,可以切割,插入dn**段,可以轉錄表達。轉基因的基本質粒之一。
構建重組質粒之前為什麼先連線t載體
6樓:匿名使用者
先連線t載體是為了提高轉化效率一般來說市面上**的t載體都進行了優化,容易連線片段(也就是效率較高),因此構建表達載體時有時會先連線t載體。同時t載體的測序引物比較明確(商業化的緣故),因此測序也方便一些。更重要的是,t載體往往設計了藍白斑篩選的功能,插入片段的載體會呈現白色,這樣也容易區分驗證,不用每個單菌落都拿去做colonypcr或提質粒酶切驗證。
當然也不是絕對的,我們實驗室就經常直接把片段酶切後連線表達載體,不經過t載體這一步,其實影響並不大。如果你的情況比較特殊(比如片段較大,或是對應的表達載體拷貝數較低等),可以考慮連線t載體,不然的話不是非常必要。
為什麼可以利用t載體對pcr產物進行轉殖
7樓:匿名使用者
t轉殖的原理是基於常規pcr反應中所使用taq聚合酶能夠在pcr產物的3『末端非特異版性新增乙個a,這樣實際上
權常規pcr產物都含有3端突出乙個a的粘性末端.基於這個原理,常規的線性t-轉殖載體(puc18和puc19等)在其3』末端新增乙個t,這樣的載體能夠和任何pcr產物進行連線轉殖,並不需要新增任何特異性的粘性末端位點.這個就是t轉殖的原理了.
t載體轉殖的介紹
8樓:手機使用者
實驗原理重組質粒的構建t質粒載體重組的dna分子是在dna連線酶的作用下,有mg2 、atp存在的連線緩衝系統中,將分別經酶切的載體分子與外源dna分子進行連線。
在生工測序連線有t載體的質粒 怎麼看哪一部分是目的片段
9樓:匿名使用者
找到載體插入位點兩端的序列,中間的就是你的目的片段。t載體一般用於pcr產物的轉殖,如果是pcr產物的話,你可以找到你擴增用的引物序列,引物及引物中間的序列就是你要的目的片段
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