1樓：南霧嶺後
片段變小？
你的目的片段裡有沒有這個酶切位點？你的目的片段有多大？
建議用雙酶切，將片段切出後電泳，如果有該片段，在電泳時就一目了然了。
2樓：匿名使用者
不會有兩個ecori酶切位點吧，正好酶切下一小段片段下來……
3樓：還月月
你要看看你的質粒上是不是有兩個酶切位點那樣的話就會切下一小部分，由於鹼基很少，所以電泳效果是看不出來的
我藍白斑已摔選挑白斑菌液體pcr驗證成功,接下來深度搖菌提質粒怎麼做？我是準備用lb10ml,a
4樓：養你過年吃肉
可以的，取10ul菌液接種到lb培養基中，220rpm，37℃過夜，lb記得加抗生素，否則會質粒丟失，完全不必加瓊脂粉。
為什麼我的目的基因連線轉殖載體轉化、提質粒後，酶切鑑定正確，而質粒pcr和菌液pcr鑑定都不正確呢？著急
5樓：匿名使用者
不管酶切還是pcr，都是間接的結果。要確定轉殖的正確，一定要測序的啊。
你測個序，問題就迎刃而解了。到底是什麼問題也就清楚了。
6樓：匿名使用者
因為 轉化過程你沒出來好 加點 kml 再轉化 提質後 分別切2 這樣就正確了
構建質粒表達載體為什麼要先連t載再連pmv261?
7樓：
先連線t載體是為了提高轉化效率
一般來說市面上**的t載體都進行了優化，容易連線片段（也就是效率較高），因此構建表達載體時有時會先連線t載體。同時t載體的測序引物比較明確（商業化的緣故），因此測序也方便一些。更重要的是，t載體往往設計了藍白斑篩選的功能，插入片段的載體會呈現白色，這樣也容易區分驗證，不用每個單菌落都拿去做colony pcr或提質粒酶切驗證。
當然也不是絕對的，我們實驗室就經常直接把片段酶切後連線表達載體，不經過t載體這一步，其實影響並不大。如果你的情況比較特殊（比如片段較大，或是對應的表達載體拷貝數較低等），可以考慮連線t載體，不然的話不是非常必要。
我的目的片段**體後，挑單轉殖搖菌，用菌液pcr，沒有條帶。為什麼啊？
8樓：阿魯巴星人
假陽性1.平板是否加抗性？
2.引物設計是否有問題？
3.載體自連現象是不是很嚴重？建議做個對照4.菌落pcr條件是否合適？
真核生物中分離到的完整的基因片段與表達載體構成的重組質粒轉化入大腸桿菌後，不能獲得表達的原因
大腸桿菌為原核生物，原核生物的基因序列中不含有內含子，也就沒有內含子的剪下機制，而真核生物中獲得的完整的基因片段中一定是含有內含子的，mrna中不含 所以，在表達上會有差異。你用的是什麼載體？如果想讓其蛋白質在大腸桿菌中大量表達 用原核表達載體比較好 大腸桿菌是原核生物。不能合成真核生物的蛋白質，往...
聯想A670T我將這款手機USB資料線連線電腦，但是360手機助手還是顯示「未連線手機」
u確保開啟sb除錯 手機段有360手機助手，沒有電腦沒有其他類似軟體開著。如果還不行就重啟手機重新開啟usb除錯 尊敬的聯想手機使用者，您好！聯想a670t手機連線電腦可實現u盤儲存功能和資料同步。正常情況下，若要實現u盤功能，建議您可直接資料線連線電腦後，在手機的螢幕頂端下拉選擇 usb已連線 然...
我心中的目的，作文，我心中的目的，作文200字
有了愛，就有陽光 有了愛，就有希望，陽光造就了希望，希望帶來了陽光，陽光和希望讓愛心之樹茁壯成長，開遍我們每個人的胸膛！題記 做出驚天動地的人是英雄，為尋求真理獻出生命的人是英雄，在平凡崗位上做出不平凡事蹟的人是英雄，在我心目中，也有英雄，他們是團隊，是集體，所以在我心裡他們就是無名英雄！在我們生活...