有人能詳細幫我解釋一下RNA的OD260 280和OD230 260的意思嗎

2021-08-09 23:21:25 字數 1095 閱讀 4196

1樓:匿名使用者

od260/a280和a260/a230是核酸純度的指示值。

純度好的dna或rna,在ph7-8.5 下od260 / od280的比值應該在2.0 或2.

5。 純淨的樣品比值大於1.8(dna)或者2.

0(rna)。如果比值低於1.8 或者2.

0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。

od230表示樣品中存在一些汙染物,如碳水化合物、鹽(胍鹽)等,較純淨的核酸a260/a230的比值大於2.0 。

【dna純度判斷根據】:dna純度的判斷根據od260/od280的比值判斷,符合要求純度高的純化dna其od260/od280在1.6-1.

8之間,低於此範圍表明蛋白質含量超標,高於此範圍表明樣品中含有rna。

【光密度概念】:od是optical density(光密度)的縮寫, od=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。吸光度(absorbance)是指光線通過溶液或某一物質前的入射光強度與該光線通過溶液或物質後的透射光強度比值的對數,影響它的因素有溶劑、濃度、溫度等。

【吸光度概念】:吸光度用a表示,a=abc,其中a為吸光係數,單位l/(g•cm),b為液層厚度(通常為比色皿的厚度),單位cm ,c為溶液濃度,單位g/l 影響吸光度的因數是b和c。a是與溶質有關的乙個常量,溫度通過影響c,而影響a。

一般來說od260代表核酸的吸光度,od280代表蛋白質的吸光度,od230代表其他雜質(多醣等)的吸光度。

【備註】:a代表吸光值,而od是光密度值,a260/a280與od260/od280的意思是一樣的。

2樓:匡雅霜

od260/280

od260是核酸吸收的最高峰,od280是蛋白吸收的最高峰。當od260/280處於1.8-2.

0時,核酸的純度較高。由於rna是單鏈,所以紫外吸收會比dna高一些,所以雙鏈dna的od260/280一般在1.8左右,而rna的od260/280在2.

0左右。

od260/230 (你寫反了)

od230是某些有機試劑和多醣的吸收峰,要是這個值很高,說明你的核酸很純,要是這個值很低,說明有有機試劑或多醣汙染。一般高於2就很好了。

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