轉染後增殖的細胞,能表達我轉染的質粒嗎

2021-03-03 21:28:39 字數 1260 閱讀 5110

1樓:豬豬將軍

不知你的

質粒copy有沒有抗性,如bai果有,在適合濃度的抗生素條du件下長起zhi來說明表達了,但是你的目的基因dao是否表達還需要通過wb來檢測。

是瞬轉吧,應該會,每個細胞轉入n個分子質粒,細胞增殖後質粒應該有機會分到多個子細胞,也有可能丟失。由於細胞損傷,增值也有限。所以只要算總量吧

質粒轉染細胞後,不表達的原因有哪些

2樓:匿名使用者

首先要確定是否已成功轉染,可以用帶螢光的載體進行核實,如觀察到螢光,這說明轉染成功;

其次要核實載體本身在轉染前是否存在問題,之前我們也遇到過類似情況,借的別人的載體,實際載體本身有問題,當然無法表達;

最後,要考慮轉染試劑的問題,如是否過期,是否能正常工作等。

3樓:愛瘋煙火的男孩

沒有與宿主細胞的染色體整合,目的基因被破壞

質粒轉染細胞多長時間提取蛋白

4樓:義翹神州加油

需要根據具體情況進行具體分析,推薦從以下角度進行分析:

對細胞表達目的蛋白的時間進行梯度設計,分別取樣然後做sds-page\wb分析;

參考實驗室經驗資料;

嘗試採用磁珠ip試劑盒產品(義翹有相關產品)進行小量樣品的快速純化;...

一般轉染多長時間後檢測細胞的變化

5樓:阿魯巴星人

轉染的質粒和promoter不同,細胞表達的時間也不盡相同。

一般在24-48小時之間。你第一次做的話,就勤快點常觀察。

我構建了乙個基因的真核表達載體,轉染293t細胞後以空質粒pcdna3.1及未轉染質粒的孔為對照,還有乙個以pbs

6樓:百浩生物

如果293t本身不表達這個蛋白的話,最大的可能是一抗質量不過關

你可以做一下免疫印跡看看。免疫組化假陽性多正常(非特異性吸附)。

免疫印跡western blotting用分子量大小來判斷,很難出假的。

7樓:伊良部一郎

是目的基因的抗體做的麼?

是不是293t本身表達這個蛋白?

8樓:匿名使用者

贏潤生物技術支援 孫永林 加**12695920

9樓:匿名使用者

題目不完整,無法作答

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beyond主奏吉他手黃貫中主唱的。詩意般的歌詞,裝滿了情誼 愛意 憂鬱。很唯美的。就像畫家描摹遠離塵囂的世外桃源,安靜的充滿了身體的每個細胞。有無盡的純樸 真誠的愛戀氣息。恬靜安詳的木結他,濃厚的民風曲調,還有點點搖滾,行雲流水般順暢自然地流淌著。除了浪漫,那略帶憂傷的結他聲就在傾訴,在宣布。生活...