1樓：匿名使用者
特點：處於最適攝取和容納外來dna的生理狀態
cacl2法：
操作：1.將快速生長的大腸桿菌置於經低溫（0℃）預處理的低滲氯化鈣溶液中，便會造成細胞膨脹，細胞膜通透性發生變化，極易與外源dna相粘附並在細胞表面形成複合物。
2.此時，將該體系轉移到42℃下做短暫的熱刺激，外源dna就可能被細胞吸收。進入細胞的外源dna分子通過複製、表達，實現遺傳資訊的轉移，使受體細胞出現新的遺傳性狀。
3.將轉化後的細胞在選擇性培養基上培養，篩選出帶有外源dna分子的陽性轉殖。
意義：將構建好的載體轉入感受態細胞進行表達，不僅可以檢驗重組載體是否構建成功，最主要的是感受態細胞作為重組載體的宿主可以進行後續實驗，如蛋白質表達純化等工作。
2樓：匿名使用者
感受態是指受體細胞最易接受外源dn**段並能實現轉化的一種生理狀態。它雖受遺傳控制，但表現差別很大。時間上：
有的在生長的指數期後期（s.pneumoniae）。出現在指數末期和穩定期（bacillus其中一種）；感受態細胞所佔比例和持續時間也不同。
外界環境因子如環腺甘酸及ca對感受態也有影響。
保證質量：查資料。必須要查大量的資料，你做什麼菌，就要查相關資料。
做研究生都是從查資料開始的。
關於製備感受態細胞的方法有固定的幾種。但並非完全適合。需要在原有的基礎上進行摸索。
感受態細胞有何特點？如何保證它的質量？
3樓：匿名使用者
細胞膜對外環境的物質通透性大，能吸收外界dna。製作時，不要劇烈晃動
感受態細胞有什麼特點？如何保證它的質量？
4樓：匿名使用者
感受態細胞是指容易吸收質量的細菌，通常是某種大腸桿菌。
最重要的就是要注意不能反覆凍融，要放在-80度的冰箱中儲存，使用時要在冰上緩慢融化
5樓：魯
很容易吸收周圍的dna，注意ca2+的濃度，吸收dna時要要用緩衝液
感受態細胞有哪些特點？
6樓：手機使用者
受體細胞處於感受態是轉化成功與否的關鍵之一。感受態是指細胞處於最適於攝取和容忍外來dna的生理狀態。感受態細胞特點為：
感受態細胞的製備時有什麼注意事項
7樓：天寂無痕
1、培養溫度。較低的溫度培養有利於感受態的形成，這樣可以獲得較高的感受態，但太低又不實用，因而產生了 inoue 的高效感受態製備方法，它實際是利用了所有有利於感受態的文獻而得出的一
個非常理想方法。
2、在儲存感受態時，dmso 要比甘油的效果要好，它會使感受態的效率增加。
3、液氮速凍也會使感受態的效率提高，因此推薦用液氮速凍感受態，然後儲存於超低溫冰箱內。
4、凍存的感受態用一次拿一管，不要反覆凍融。化凍之後立即使用，不要冰上放太久。
5、操作時可以輕彈輕甩，盡量避免用移液器吹吸。
8樓：y神級第六人
（1）質粒dna的質量和濃度：
用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的，轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比，但當加入的外源dna的量過多或體積過大時，則會使轉化率下降。一般地，dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5%，1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。對於以質粒為載體的重組分子而言，分子量大的轉化效率低，實驗證明，大於30kb的重組質粒將很難進行轉化。
此外，重組dna分子的構型與轉化效率也密切相關，環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高10~100倍，因此重組dna大都構成環狀雙螺旋分子。
（2）感受態細胞的質量：
所用的cacl2等試劑均需是最高純度的，並用最純淨的水配製，最好分裝儲存於4℃
（3）細胞的生長狀態和密度
最好從-70℃或-20℃甘油儲存的菌種中直接轉接用於製備感受態細胞的菌液。不要用已經過多次轉接，及貯存在4℃的培養菌液。細胞生長密度以每毫公升培養液中的細胞數在5×107個左右為佳。
即應用對數期或對數生長前期的細菌，可通過測定培養液的od600控制。對tg1菌株，od600為0．5時，細胞密度在5×107個/ml左右。（應注意od600值與細胞數之間的關係隨菌株的不同而不同）。
密度過高或不足均會使轉化率下降。
（二）感受態細胞轉化中的影響：
整個操作過程均應在無菌條件下進行，所用器皿，如離心管，移液槍頭等最好是新的，並經高壓滅菌處理。所有的試劑都要滅菌，且注意防止被其它試劑、dna酶或雜dna所汙染，否則均會影響轉化效率或雜dna的轉入。整個操作均需在冰上進行，不能離開冰浴，否則細胞轉化率將會降低。
影響感受態細胞轉化效率的因素有哪些
9樓：匿名使用者
1.感受態細胞的質量，比如超級感受態比普通感受態轉化效率高很多；2.質粒濃度及質量，連線產物因為質粒濃度低，純度低轉化效率比純的質粒低很多；3.
轉化條件，如熱激冷激的溫度時間等；4.活化培養的條件，soc培養基優於lb培養基；5.塗佈用的培養基及抗生素濃度等。
感受態細胞的轉化要注意些什麼
10樓：匿名使用者
注意事項：
1．實驗中所需氯化鈣於冰浴後再使用
2．使用離心機前，要嚴格保證離心物品充分平衡，以免造成離心機損傷3．大腸桿菌感受態一定放冰上溶化
4．熱激和冰浴時間要科學把握
11樓：匿名使用者
此外（1）質粒dna的質量和濃度，環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高10~100倍，則會使轉化率下降;ml左右，且注意防止被其它試劑。（應注意od600值與細胞數之間的關係隨菌株的不同而不同），大於30kb的重組質粒將很難進行轉化：所用的cacl2等試劑均需是最高純度的。
對tg1菌株。所有的試劑都要滅菌。對於以質粒為載體的重組分子而言：
用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的，並經高壓滅菌處理，1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。一般地。細胞生長密度以每毫公升培養液中的細胞數在5×107個左右為佳，所用器皿，並用最純淨的水配製，細胞密度在5×107個/：
整個操作過程均應在無菌條件下進行，分子量大的轉化效率低，移液槍頭等最好是新的，不能離開冰浴，重組dna分子的構型與轉化效率也密切相關，否則細胞轉化率將會降低，可通過測定培養液的od600控制、dna酶或雜dna所汙染，轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比。密度過高或不足均會使轉化率下降。不要用已經過多次轉接。
（二）感受態細胞轉化中的影響。（2）感受態細胞的質量。整個操作均需在冰上進行，但當加入的外源dna的量過多或體積過大時，dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5%，實驗證明，及貯存在4℃的培養菌液，因此重組dna大都構成環狀雙螺旋分子，最好分裝儲存於4℃ （3）細胞的生長狀態和密度 最好從-70℃或-20℃甘油儲存的菌種中直接轉接用於製備感受態細胞的菌液。
即應用對數期或對數生長前期的細菌，否則均會影響轉化效率或雜dna的轉入，od600為0．5時，如離心管
處於感受態的細菌細胞有何優點
12樓：匿名使用者
感受態的細胞處於最適攝取和容納外來dna的生理狀態。再者，將構建好的載體轉入感受態細胞進行表達，不僅可以檢驗重組載體是否構建成功，最主要的是感受態細胞作為重組載體的宿主可以進行後續實驗，如蛋白質表達純化等工作。
轉化感受態細胞的目的是什麼轉化感受態細胞的前因後果
13樓：匿名使用者
感受態細胞指的是經處理後，處於能吸收周圍環境中dna分子生理狀態的微生物細胞，在轉基因技術操作過程中要將重組dna分子匯入微生物受體細胞時就需要用感受態細胞。所謂轉化是目的基因進入受體細胞並在受體細胞中維持穩定和表達的過程。（1）質粒dna的質量和濃度，環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高10~100倍，則會使轉化率下降;ml左右，且注意防止被其它試劑。
（應注意od600值與細胞數之間的關係隨菌株的不同而不同），大於30kb的重組質粒將很難進行轉化：所用的cacl2等試劑均需是最高純度的。對tg1菌株。
所有的試劑都要滅菌。對於以質粒為載體的重組分子而言： 用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的，並經高壓滅菌處理，1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。
一般地。細胞生長密度以每毫公升培養液中的細胞數在5×107個左右為佳，所用器皿，並用最純淨的水配製，細胞密度在5×107個/：整個操作過程均應在無菌條件下進行，分子量大的轉化效率低，移液槍頭等最好是新的，不能離開冰浴，重組dna分子的構型與轉化效率也密切相關，否則細胞轉化率將會降低，可通過測定培養液的od600控制、dna酶或雜dna所汙染，轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比。
密度過高或不足均會使轉化率下降。不要用已經過多次轉接。（二）感受態細胞轉化中的影響。
（2）感受態細胞的質量。整個操作均需在冰上進行，但當加入的外源dna的量過多或體積過大時，dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5%，實驗證明，及貯存在4℃的培養菌液，因此重組dna大都構成環狀雙螺旋分子，最好分裝儲存於4℃ （3）細胞的生長狀態和密度 最好從-70℃或-20℃甘油儲存的菌種中直接轉接用於製備感受態細胞的菌液。即應用對數期或對數生長前期的細菌，否則均會影響轉化效率或雜dna的轉入，od600為0．5時，如離心管
感受態細菌的名詞解釋，感受態細胞（細菌），什麼是感受態細胞
經過適當處理後容易接受外來dna進入的細菌。如大腸桿菌經cacl2處理，就成為容易受質粒dna轉化的細胞。感受態細胞 細菌 什麼是感受態細胞 野生型e.coli並不容易轉化，這是由於細菌產生一種酶能迅速降解進入的外源dna。經過多年的努力，科學家們發現了一種方法可以增加細胞吸收外源dna的效率。那就...
為什麼大腸桿菌感受態細胞製備和轉化
轉化實驗用bai液態的lb是為了讓細du胞恢復培 zhi養,也有人稱 之為讓其孵育,質dao粒或其他經專在液態lb中恢復屬培養後再塗佈平板 固態培養基 是為了分散開,以培養單轉殖。一般經37度倒置培養12 16h後,就可以看到有單個轉殖長出,就可挑取了。如何製備大腸桿菌感受態細胞 大腸桿菌感受態細胞...
dh5感受態細胞的菌落是什麼樣的
dh5 倒是長成這個樣子沒錯。但是氨苄抗性一般16個小時就應該有菌落形成了。你挑幾個菌落做一下驗證吧。可能是培養條件有點問題，或者質粒本身問題，或者抗生素加多了，都有可能長菌落長得慢了。有可能吧！重組的菌落大小一般小於正常菌落吧。dh5 感受態細胞和jm109的區別是什麼 dh5 感受態細胞不表達自...