1樓:匿名使用者
多發性骨髓瘤(mm)在我國的發病率呈不斷上公升的趨勢,且 該病嚴重影響患者的生活質量和生存期。mm至今尚不能被**。目前採用的 常規化/放療又不能從根本上延長患者的無病生存期(dfs)及總生存期(os)。
微小殘留病灶(mrd)的存在常是化療耐藥和**的主要原因,因此迫切需要 有新的**策略。腫瘤的免疫**自80年代以後有了飛躍發展。其中,以抗原 特異性細胞毒t淋巴細胞介導的腫瘤的免疫**已成為新的熱點。
抗原的識別、 加工、提呈以及t細胞的致敏、啟用和擴增都依賴於抗原遞呈細胞(apcs)的 參與。目前認為樹突狀細胞(dendritic cells,dcs)是功能最強的專職性apcs; dcs能攝取和加工、提呈抗原,表達高水平的mhc分子、共刺激分子和粘附 分子。它能夠顯著地刺激***** t細胞增殖,從而啟動免疫反應,所以dc是比 較理想的apc。
因此,我們設想通過體外擴增mm患者自體dc,然後以合適 的抗原衝擊致敏dc以誘導mm抗原特異性ctl,為mm患者dc疫苗的臨床 應用打下實驗基礎。 目的:觀察不同濃度ifnα聯合gm-csf誘導健康者及mm患者外周血單 核細胞生成樹突狀細胞(dendritic cells,dcs)的作用,比較與健康者與mm患 者的dc在形態、數量、免疫表型以及功能上的差異。
研究mm患者外周血單核細胞**的dc在mm細胞株u_(266)細胞可溶性抗原及經絲裂黴素c處理過的 u_(266)細胞激發**外誘導的u_(266)特異性ctl的作用。 實驗方法:從健康者外周血獲得的單核細胞在gm-csf 800u/ml加不同濃 度ifnα條件下培養8天,觀察形態,檢測免疫表型及初步的功能測定,以選 擇合適的ifnα濃度;應用gm-csf 800u/ml加ifnα600u/ml體外培養mm 與健康者外周血單核細胞,8天後進行形態學、免疫表型檢測和混合淋巴細胞反應;將mm患者外周血**的貼壁單核細胞在gm-csf/ifnα條件下利用無 血清技術培養生成dc,應用絲裂黴素c處理過的u_(266)細胞及用u_(266)細胞製備 第二軍醫大學 碩士學位**的可溶性抗原刺激dc,然後與自體淋巴細胞共同孵育5-7天以誘導生成特異性ctl,來用 my法檢測對um細胞的殺傷效果。
實驗結果:mm 患者與健康者志願者外周血單核細胞在 gm-csf 800ullnl 聯合 ifn a 60… r下(ifn a 600ultnl為最合適的濃度)培養 8天後生成 具有典型特徵的dc,高度表達mllc皿類分子、共刺激分於cd40、cd86以及 粘附分於(添85%人cd14的陽性表達低於10o/o,但cd83陽性表達比較低0.! 土2.2%人兩者在數量、兔疫表型陽性率上無顯著差異(p0.05入而且同樣能 強烈激發同種 t淋巴細胞槽殖。
應用 my法檢測 uw細胞及其可溶性抗原激 發的dc誘導特異性ctl對靶細胞u266的殺傷率分別為zi.2土5.個瓜和28.0土 76%,對照組未經抗原刺激 dc組分別為 1!.7土4.3%gu 9.5土3.8%(p<0.ofh 而不加dc介導以抗原直接刺激自體淋巴細胞組為15.6土4.8o和13.l士5.5o, (p<0.of人實驗顯示 ue細胞及其可溶性抗原成分激發的 dc與自體淋巴細胞 孵育能誘導出ue特異性c幾。本研究進一步證實了mm患者的dc介導特異性抗瘤作用是有效的。
多發性骨髓瘤怎麼看免疫固定電泳資料
血清游離輕鏈和免疫固定電泳哪個準
檢測m蛋白為什麼選血清蛋白區帶電泳
2樓:
血清蛋白電泳即用電泳方法測定血清中各類蛋白佔總蛋白的百分比。對於肝、腎疾病和多發性骨髓瘤的診斷有意義。血清蛋白電泳 - 臨床意義 1.骨髓瘤:
呈現特異的電泳圖形,大多在γ球蛋白區(個別在β蛋白區)出現乙個尖峰,稱為m蛋白。
2.腎臟疾病:
(1)腎病症候群:有特異的電泳圖形,噸球蛋白明顯增加,p球蛋白輕度增高,白蛋白降低,γ球蛋白可能下降;
(2)腎炎:急性腎炎時α2 球蛋白可增高,有時合併γ球蛋白輕度增高;慢性腎炎時常可見到γ球蛋白中度增高。
3.肝臟疾病:
(1)肝硬變:有典型的蛋白電泳圖形,γ球蛋白明顯增加,γ和β球蛋白連成一片不易分開,同時白蛋白降低;
(2)急性肝壞死:白蛋白明顯下降,球蛋白顯著公升高;
(3)傳染性肝炎患者血清白蛋白輕度下降,α2 球蛋白增高並伴有γ球蛋白增高;
4.炎症、感染:在急**染的發病初期,可見α1或α2球蛋白增加;在慢性炎症或感染後期,可見γ球蛋白增加。
5.低γ球蛋白血症或無γ球蛋白血症:血清γ球蛋白極度下降或缺乏。空腹12小時取靜脈血。
3樓:匿名使用者
m蛋白的檢測與鑑定
一、m蛋白的基礎知識
m蛋白是漿細胞或b 淋巴細胞單轉殖大量增殖時所產生的一種異常免疫球蛋白,其氨基酸組成及排列順序十分均一,空間構象、電泳特徵也完全相同,本質為免疫球蛋白或其片段(輕鏈、重鏈等)。由於它產生於單一轉殖(monoclone),又常出現於多發性骨髓瘤(multiple myeloma)、巨球蛋白血症(macroglobulinemia)、惡性淋巴瘤(malignantlym phoma) 病人的血或尿中,故稱m 蛋白。這些m 蛋白大多無抗體活性,所以又稱為副蛋白(paraprotein)。
m 蛋白血症可分為惡性與意義不明的兩大類。惡性m 蛋白血症多見於多發性骨髓瘤(包括輕鏈病)、巨球蛋白血症、重鏈病、7sig m 病(solomen -konkel 病)、半分子病及不完全骨髓瘤蛋白病(c 端基因缺陷) 等。意義不明的m 蛋白血症(monoclonal gammopathyof undetermined significance ,m g us) 又分為兩種,一種是與其他惡性腫瘤(如惡性淋巴瘤) 伴發者,另一種即所謂良性m 蛋白血症。
m 蛋白的檢測方法主要有瓊脂或瓊脂糖電泳、免疫電泳、免疫固定電泳、選擇免疫電泳等。
二、m蛋白的鑑定
1.多發性骨髓瘤與巨球蛋白血症時的m 蛋白檢測和鑑定
(1)血清總蛋白定量。90% 的患者血清總蛋白含量公升高(70% 的患者>100g/l),約10%的患者正常或甚至偏低(如輕鏈病時)。
(2)血清蛋白醋纖膜或瓊脂糖電泳。m 蛋白在電泳時出現典型的單株峰(亦稱m區帶),特點是區帶窄而濃,掃瞄時呈現尖高峰,在γ區高比寬≥2,在β區≥1。此m區帶可因ig的不同而出現在在γ~α2的任何區域。
m蛋白增殖的另一特點是其他各區
帶明顯減少,顯示影象較簡單。有時有的患者血中m蛋白並不高,這是由突變細胞的ig分泌能力決定的。這種病人的血清在電泳時m峰可不明顯,易被其他蛋白掩蓋,需採用稀釋血清成應用其他敏感方法如免疫固定電泳來檢測。
(3)血清ig定量。一般m蛋白所屬ig含量均顯著增高,其他類ig則正常或顯著減低。
(4)免疫電泳。
① 正常人血清免疫電泳結果:可分辨出20 多種蛋白成分。在陽極端有船形很濃的沉澱線為白蛋白。
通常ig組分靠陰極端,最靠近加樣孔者為ig m,依次為iga、igg,三者成平滑的連續沉澱線。
② 多發骨髓瘤:多發性骨髓瘤分igg、iga、ig m、igi)和ige5 種,igg 和iga 又分亞類,所有ig的輕鏈又分兩個型。因此,免疫電泳時變形沉澱線的位置隨各分子的電泳區帶不同而異,從慢γ~β2區皆可出現。
igg 1 多出現在慢γ區,igg 4 在β~α
2區。m 蛋白與相應的抗重鏈血清、抗輕鏈血清形成遷移範圍十分侷限的濃密的沉澱弧。由於此種病人血清中ig 含量甚高,免疫擴散時可出現抗原絕對過剩而不出現沉澱線,此時需稀釋血清重做,往往可獲得滿意結果。
③ 巨球蛋白血症:由於igm 分子大量增殖所致。在免疫電泳時,常常出現以下特徵:
一是沉澱線明顯變形。正常情況下,igm形成短小沉澱線,不易看到變形。當igm大量出現時,則會使整個igm沉澱線變形。
二是抗原孔周圍和電泳縱軸出現團塊狀沉澱。三是電泳時igm組分無遷移,這多是ig m分子聚合,電泳不移動所致。
(5)尿本-周蛋白檢測。
① 定性檢測: 用熱沉澱法和磺基水楊酸法。
② 免疫電泳法:用待檢尿濃縮後進行免疫電泳,大多數多發性骨髓瘤病人和輕鏈病患者,僅出現一條緻密的弓形彎曲的沉澱線。本法60%~80%的骨髓瘤病人和幾乎全部輕鏈病病人可檢出尿本週蛋白。
③ 輕鏈白蛋白-戊二醛交聯免疫電泳法:多發性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血症及輕鏈病可呈陽性,正常人陰性。本法尿本週蛋白檢出率為100%,假陽性4%,尿中含有200μg/ml 時即可出現陽性結果。
2.重鏈病時m 蛋白檢測與鑑定
與多發性骨髓瘤相同,免疫電泳時由於重鏈分子較ig 分子小,故遷移率快,電泳位置較靠陽極側(β~α)。但重鏈病一般需選擇免疫電泳證實。
3.7sig m 病時m 蛋白的檢測與鑑定
一般ig m 為五聚體,沉降係數為19s ,而7s igm患者的igm為單體,沉降係數為7s 。證明7s igm 有兩種方法:一種是在測定ig m 總量後,將被測血清1~2 ml 過sepharose 6b柱,再根據洗脫峰圖用面積儀測出7s ig m佔總igm的百分比,與ig m總量換算即得7s igm的絕對值。
另一方法即為植物血凝素(pha)選擇電泳。此法原理是五聚體ig m可與pha 結合形成沉澱,而單體igm不與pha結合。在瓊脂膠中加入pha,後進行電泳,五聚體igm 被p h a 所阻留,而7s ig m 繼續向陽極泳動,並可與隨後加至抗體槽中的ig m 抗血清反應,形成單一沉澱弧。
多發性骨髓瘤患者,血清蛋白電泳圖譜有何特徵性的表現
4樓:正星科技管業
多發性骨髓瘤的診斷要點。1.有典型的臨床表現。
有骨痛、病理性骨折、貧血、出血傾向、腎功能損害、反覆感染和免疫球蛋白異常為特徵。該病好發年齡為40歲以上。 2.
血清蛋白電泳:丁或日球蛋白顯著增高,或p及7球蛋白之間出現呈單株峰型m球蛋白。
骨髓瘤的症狀,多發性骨髓瘤早期症狀?
詳細症狀 骨髓瘤是中年和晚年 40 60歲 發生的多發惡性骨髓內腫瘤。椎體 肋骨 胸骨 顱骨和骨盆為其好發部位。晚期,股骨和肱骨亦可被累,但膝和肘以下的骨質極少發生。其主要症狀為疼痛,初期為間歇性,繼為持續性,疼痛十分劇烈。神經可能被壓迫,造成放射性疼痛或截癱。腫瘤一旦發現後,多數患者逐漸發生進行性...
癌痛有多痛,多發性骨髓瘤 癌痛 有什麼有效的止痛藥?
癌痛患者通常都經歷不止一種疼痛。這種疼痛可能是持續性或間歇性,或迭疊在慢性疼痛之上的急性疼痛。這種疼痛可能是和疾病相關的,也或是和 相關的。心理因素,例如抑鬱 焦慮,以及認知形式,都可能影響疼痛知覺並增大疼痛的強度。癌症患者中疼痛的多重因素 腫瘤擴張引起對周圍組織的壓力。腫瘤分泌炎性因子和痛敏因子。...
多發性硬化的治療,如何治療多發性硬化?
多發性硬化的方法 多發性硬化專欄 多發性硬化經常發生在20歲一45歲的人群中。這是由於保護神經纖維的髓鞘出現疤而引起的,但至今尚不清楚它如何發生。一系列症狀包括麻木與肢體疼痛 視力問題 身體過度震顫 乏力 發音困難 意識不清和不能清楚地思考問題。多發性硬化症通常有乙個起病和緩解的基本過程,有些病人一...