1樓:
電壓不要太高,否則會拖尾。電泳緩衝液最好新配,否則溶液中離子濃度會改變。上樣量不可過大,否則會手牽手
2樓:1志邦科技
這個需要很複雜的工藝的。不是一下子就能說清楚的。而且有些還涉及到工藝問題。
所以這個一般都很少人透露
出來的條帶不清晰,怎樣才能跑出來好看的條帶
3樓:超級情情情兩難
這個跟引物好壞有很大關係,好的引物易與dna模板特異性結合,gc含量、tm值等也利於pcr擴增產物,不好的引物可能本身與dna結合就不夠緊密或者不能特異性結合,還有就是本身容易形成二聚體,擴增效率也不高,導致pcr產物量少甚至根本沒有,自然跑不出條帶
如何跑出漂亮的sds-page電泳圖
4樓:匿名使用者
蛋白膠啊,我的經驗是三點。第一,配膠的時候要充分混勻。如果是雙層膠,配完下層加水封的時候,一定要緩慢滴加,均勻封壓,歪一點的話就不太好了。
第二,儘可能低電壓長時間的跑,這樣條帶比較平比較好看。第三,不到萬不得已,不要用最旁邊的泳道,基本上一定會斜的...祝實驗順利。
電泳怎麼都跑不出條帶
5樓:北京索萊寶科技****
每次電泳時候跑marker了嗎?如果marker沒有,是膠的問題,可能是核酸染料加少了或者電泳時間過長,染料跑沒了。如果marker有,多半是樣品的問題。
或者是跑膠時間過長 樣品都跑出去
瓊脂糖凝膠電泳圖上樣孔中的條帶跑不出來怎麼回事? 5
6樓:匿名使用者
每次做電泳時有沒有跑marker,如果marker沒有,是膠的問題,可能是核酸染料加少了或者電泳時間過長,染料跑沒了。如果marker有,多半是樣品的問題,或者是跑膠時間過長 樣品都跑出去。
7樓:普黎昕
點樣沒點好或者制孔沒制好,樣品沒提出dna根據目的條帶長度來調整凝膠濃度,一般1.5%左右,也不一定。
紫外燈下沒見帶,不一定沒有出孔,而是量少看不到,可以測一下濃度看一下,或直接試跑一下pcr。
電泳時間可能過長,一般75v×30min左右,但是具體看溴酚藍的離孔距離和目的條帶離孔距離。
8樓:匿名使用者
暈 怎麼會做成這樣的 一個都沒跑出來 樣品是什麼 不會都是非極性分子吧
跑電泳為什麼跑出來的條帶離樣品孔很近
9樓:匿名使用者
說明分子量很大~是核酸電泳還是蛋白電泳~
請教 如何將瓊脂糖凝膠電泳跑漂亮
10樓:
用瓊脂糖凝膠就行,用tae電泳緩衝液,應該是三條帶,或者是抹帶。
我是初學者,跑出來的蛋白電泳圖,那些一排一排的條帶是什麼意思,還有一列一列的
11樓:匿名使用者
你的膠是考染的嗎?
首先你得先知道一點蛋白質的基本理論知識(不會不知道吧?難道你是學醫的?),或者說蛋白質(包括其他分子,如dna、rna等)電泳的原理(或者說是分離原理)。
只說蛋白質:蛋白質在正常情況下,一般帶有負電荷,因由不同的蛋白分子因為性質(空間結構以及基團性質)不同而帶電量不同,這樣結合蛋白質分子本身的不同質量,會在電場下(即電泳中)產生不同的移動速度,進而將不同的蛋白分離開。又為了消除蛋白質分子間性質的差別,創造一個單一因素的電泳分離條件,所以在進行蛋白質電泳之前,都會對蛋白質進行變性處理(非變性膠等不在此列),使蛋白質肽鏈開啟:
sds是陰離子去汙劑,作為變性劑和助溶試劑,它能斷裂分子內和分子間的氫鍵,使分子去摺疊,破壞蛋白分子的
二、**結構。而強還原劑如巰基乙醇,二硫蘇糖醇能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和sds後,分子被解聚成多肽鏈,解聚後的氨基酸側鏈和sds結合成蛋白- sds膠束,所帶的負電荷大大超過了蛋白原有的電荷量,這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結構差異。
如此,蛋白質(準確的說應該是變形後的蛋白質或者是蛋白- sds膠束)便會在電場中根據不同的帶電量- 亦即分子量而分成不同的條帶。每一條帶代表著不同分子量大小的蛋白質組合(一組蛋白質)。
上面只說的是sds-page膠蛋白質電泳。當然,在電泳後,需要進行染色,你才能看到蛋白條帶(marker除外,因為它是帶有耦合染料的蛋白質分子或片段)。
12樓:匿名使用者
一個條帶代表一種氨基酸。電泳的原理生化書上自己看
13樓:一直嚮往安靜
給個圖才能解釋。不給圖怎麼解釋啊
電泳條帶在電泳孔處集中且很亮怎麼解釋
14樓:匿名使用者
如果是eb染的,如果如浙大阿米巴所說,在膠上挖個洞,沒有dna與eb的複合物在裡面,在紫外燈下看是不可能很亮的.普通的折光,在紫外下面根本沒什麼區別.
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