1樓：小青年
1. 細胞核的改變：由於凋亡細胞核的改變，造成各種染色體螢光染料對凋亡細胞dna可染性發生改變。
研究表明，用各種染色體螢光染料對經固定的凋亡細胞進行染色，其dna可染性降低。許多學者把這種dna可染性的降低認為是凋亡細胞的標誌之一。
2. 光散射特性：凋亡細胞形態上的改變影響它們的光散射特性。
在流式細胞儀上，前散射光與細胞的大小有關，而側散射光反映的是光在細胞內的折射作用，與細胞內的顆粒多少有關。在細胞凋亡時，細胞固縮，體積變小，故前散射光降低，這一特性往往被認為是凋亡細胞的特點之一。此外細胞凋亡時由於染色體降解，核破裂形成，細胞內顆粒往往增多，故凋亡細胞側散射光常增加。
細胞壞死時，由於細胞腫脹，其前散射光增大；側散射光在細胞壞死時也增大，因此可根據前散射光和側散射光區別凋亡細胞和壞死細胞。但需要注意的是，根據前散射光和側散射光判斷凋亡細胞的可靠性受被檢測細胞形態上的均一性和核胞漿比率影響很大。因此在某些淋巴細胞凋亡中，用光散射特性檢測凋亡的可靠性較好，而在腫瘤細胞凋亡中，其可靠性就較差。
根據光散射特性檢測凋亡細胞最主要的優點是可以將光散射特性與細胞的表面免疫螢光分析結合起來，用以區別經這些特殊處理發生選擇性凋亡的淋巴細胞亞型。也可用於活細胞的分類。
pi單染色法的介紹
2樓：溫柔ˉp紎空
pi單染色法原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特徵性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特徵性。
怎樣利用pi單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡
3樓：匿名使用者
pi 單染並不是很好的看凋亡的方法。一般可以作為早期的篩選實驗，因為特異性不好
方法和做細胞週期是一樣的，你可以查一下做細胞週期的實驗方法，我這裡就不貼了。
幾點注意：
一定要設定單細胞gate，以防多聚細胞核雜質的干擾rna酶不要忘記了
固定時間半小時足以，千萬不要在酒精中過夜，不然會產生大量碎片
請教流式細胞術pi染色進行細胞週期分析的原理
4樓：北京索萊寶科技****
實驗原理：流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中，在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱。
通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測，得到該細胞的光散射和螢光指標，分析出其體積、內部結構、dna、rna、蛋白質、抗原等物理及化學特徵。
細胞內的dna含量隨細胞週期程序發生週期性變化，如g0/g1期的dna含量為2c，而g2期的dna含量是4c。利用pi標記的方法，通過流式細胞儀對細胞內dna的相對含量進行測定，可分析細胞週期各時相的百分比。
進行簡單染色的目的及原理是什麼
5樓：淺若清風
目的：破壞細胞膜的選擇透過性，再使用染色劑，將生物組織浸入染色劑內。
原理：使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色，產生不同的折射率，以便觀察。
最常用的是蘇木精和伊紅染色法；按照現代的染色理論的觀點，染料之所以能夠上染纖維，並在纖維織物上具有一定牢度，是因為染料分子與纖維分子之間存在著各種引力的緣故。
6樓：匿名使用者
細菌的簡單染色
（1）觀察微生物時為什麼必須採用染色方法細菌、真菌、和其他微生物的細胞質是透明的，不借助染色方法很難觀察到這些微生物。
（2）簡單染色的生化原理
細菌細胞通常帶負電荷，簡單染色時採用已知的、帶正電荷的鹼性染料與菌體細胞黏附使菌體著色。經染色後的細菌細胞與背景形成鮮明對比。
pi單染色法的試劑與儀器
7樓：迷迭逆夏
pbs溶液；
pi染液：將pi溶於pbs（ph7.4）中，終濃度為100ug/ml。用棕色瓶4℃避光儲存。
70%乙醇
400目篩網
流式細胞儀
紅墨水染色法的實驗原理是什麼？
怎樣利用pi單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡？
8樓：齊進訾昆琦
基本bai原理
流式細胞儀檢測細胞凋亡
du：pi單染色法其原
zhi理主dao
要是根據細胞凋亡時在細胞、亞版細胞和分子水權平上所發生的特徵性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特徵性，主要包括以下幾個方面：
1、細胞核的改變
由於凋亡細胞核的改變，造成各種染色體螢光染料對凋亡細胞dna可染性發生改變。研究表明，用各種染色體螢光染料對經固定的凋亡細胞進行染色，其dna可染性降低。許多學者把這種dna可染性的降低認為是凋亡細胞的標誌之一。
生物幫上面有詳細的介紹，shrna
設計原則
細菌的單染色法實驗中塗片為什麼要固定
9樓：竹葉_卿
主要兩個作用：殺死細菌；使菌體與玻片粘附牢固（染色水洗時不易沖掉）。
10樓：匿名使用者
簡單染色
法：利用單一染料對細菌進行染色的一種方法.例如番紅.
1．塗片：用灼燒滅菌冷卻後的接種環挑取少量菌體與水滴充分混勻,塗成極薄的菌膜.
2．乾燥：可自然晾乾,或將塗片置於火焰高處微熱烘乾,但不能直接在火焰上烘烤.
3．固定：手執玻片一端,有菌膜的一面朝上,通過迅速通過火焰2-3次（用手指觸塗片反面,以不燙手為宜）.
4．染色：加適量(以蓋滿菌膜為度)結晶紫染色液(或石炭酸複紅液),染l～2min.
5．水洗：用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時為止.
6．乾燥
7．鏡檢
復染色：利用用兩種以上染料對細菌進行染色.例如革蘭氏染色法.
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,需要鹼性染料（basic dye）初染液；媒染劑（mordant）；脫色劑（decolorising agent）和復染液（counterstain）.
革蘭氏染色法的原理，革蘭氏染色的步驟和原理
革蘭氏染色法的原理是通過結晶紫初染和碘液媒染後，在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物，革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚 肽聚醣網層次較多且交聯緻密，故遇乙醇脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙。因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色 而革蘭氏陰性...
剛果紅染色法為什麼要加入氯化鈉
用這方法判斷酶活力大小的,實際上剛果紅是結合到培養基的多醣底物,但分解纖維素的細菌可以產纖維素酶,能分解這個多醣底物成為寡糖,這樣剛果紅就不能結合上去了,氯化鈉呢就可以使結合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明圈,大的透明圈當然分解纖維素的能就強啦.剛果紅染色法的原理 剛果紅能與培養基中的纖維...
細菌經革蘭氏染色法後,為什麼有的是呈紫色,有的卻是紅色
革蘭式染色的步驟是 結晶紫初染,脫色,番紅復染。革蘭式陽性菌的細胞壁能保留結晶紫,故染色後是紫色的 陰性菌不能保留,結晶紫被脫色劑脫掉,復染時被染成紅色 這是跟細菌的細胞抄壁的結構bai和它的成分有關。du對於革蘭氏陽性菌,它zhi的細胞壁比較厚 dao肽聚醣含量高和其交聯較緊密,故遇乙醇時,肽聚醣...