1樓:鬧閱共
最好加甘油,否則菌體會自溶的!建議你做成甘油管,甘油終濃度30%-50%都是可以的然後放到-20儲存起來應該就沒問題了,我就是這麼做的,甘油管在-20儲存幾個月都是沒問題的!
做單轉殖測序是菌液好還是菌液pcr後測好
2樓:匿名使用者
菌液pcr有風險,因為pcr是有乙個級聯放大的效應在裡專面,只要在菌液屬中沾了一點轉化時用的核酸片段,就有可能會擴增出來。但是送去測序的時候,很可能是假陽性,沒有連入任何片段(以前我們就碰到過這種情況,而且還是通過藍白斑篩選的)。
如果實在沒有iptg和x-gal,也最好能先挑幾個單菌落去做菌落pcr,從中選取陽性的菌落去做液體搖菌,提質粒,找乙個目標判斷上有的酶做乙個單切,同時用自連的空載作為對照,看是否能夠切開。如果菌體轉殖切開了,空載切不開,才能說明找到了陽性轉殖。送去測序才比較可靠。
否則直接送去測序,很可能全是空載,白白耽誤時間。
為了節省時間,也可以先送去測序,等待測序的過程中,進行酶切驗證,對了更好,不對趕緊找其他的菌去送樣。
高通量測序的insertsize怎麼計算
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