1樓:聽風
因為鹼基互補配對啊。rna不光和dna雜交,還可以和rna雜交。
rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或內rna原位雜交。該技術
容是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的rna核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。
rna原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
原位雜交dna和rna使用的dig是一樣的麼
2樓:
核酸雜交種物標準技術,用於檢測dna或rna特定序列(靶序列).經典核酸雜交dna或rna先轉移並固定硝酸纖維素或尼龍膜,與其互補單鏈dna或rna探針用放射性或非放射性標記,膜雜交,探針通氫鍵與其互補靶序列結合,洗未結合游離探針,經放射自顯影或顯色反應檢測特異結合探針.
經典核算雜交主要包括:dna印跡雜交(southern blot)rna印跡雜交(northern blot)及斑點雜交原位雜交:
1、 dna印跡雜交(dna blot hybridization)——兩種核酸印跡:
dna或rna溶液直接點於硝酸纖維素膜或尼龍膜(斑點或狹線印跡)
經瓊脂糖凝膠電泳片段dna或rna轉移膜(southernnorthern印跡).dna電泳前先用限制性內切酶消化.
2、 rna印跡雜交(rna blot hybridization):
rna印跡雜交種檢測已固定濾膜總rna或mrna特定靶序列技術.
3、 斑點雜交
少量核酸品點硝酸纖維素濾膜,80°C烘烤牢固固定膜,再用探針進行雜交.尼龍膜,特別聚偏氟乙烯(pvdf)與dna結合力更高,堅韌、易操作.點手工,用手工點品.
檢測用放射性探針自顯影或非放射性探針顯色.用於dna或rna析.
4、 原位雜交
保持細胞形態條件,進行細胞內雜交,顯影或顯色.用於dna或rna析.螢光原位雜交(fish)進行染色體dna析用於物研究許領域及臨床細胞遺傳研究.
其主要優點僅細胞裂期,且裂間期核診斷染色體變化.
廣義核酸雜交指非同源核酸間復性(氫鍵結合)程.說,目前基檢測技術,除質普外都或或少涉及核酸雜交原理.pcr引物復性程、基晶元雜交檢測程、基測序引物復性程及各種snp檢測等等.
原位雜交技術的原位雜交的基本原理
3樓:哈比
原位雜交技術的基本原理是利用
核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測dna或rna互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000) 。
rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或rna原位雜交。該技術是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:
在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的rna核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。rna原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
原位雜交和核酸雜交是一種嗎
4樓:匿名使用者
核酸雜交方法是一種分子生物學的標準技術,用於檢測dna或rna分子的特定序列(靶序列).經典的核酸雜交方法是將dna或rna先轉移並固定到硝酸纖維素或尼龍膜上,與其互補的單鏈dna或rna探針用放射性或非放射性標記,在膜上雜交時,探針通過氫鍵與其互補的靶序列結合,洗去未結合的游離探針後,經放射自顯影或顯色反應檢測特異結合的探針.
經典的核算雜交方法主要包括:dna印跡雜交(southern blot)rna印跡雜交(northern blot)以及斑點雜交和原位雜交:
1、 dna印跡雜交(dna blot hybridization)——有兩種核酸印跡法:
將dna或rna溶液直接點樣於硝酸纖維素膜或尼龍膜上(斑點或狹線印跡)
經瓊脂糖凝膠電泳將片段的dna或rna轉移到膜上(southern和northern印跡法).dna在電泳前先用限制性內切酶消化.
2、 rna印跡雜交(rna blot hybridization):
rna印跡雜交是一種檢測已固定在濾膜上的總rna或mrna特定靶序列的技術.
3、 斑點雜交
將少量核酸樣品點樣在硝酸纖維素濾膜上,80°C烘烤後可牢固地固定在膜上,再用探針進行雜交.尼龍膜,特別是聚偏氟乙烯(pvdf)與dna結合力更高,堅韌、易操作.點樣可手工,也可用手工點樣品.
檢測可用放射性探針自顯影或非放射性探針顯色.可用於dna或rna分析.
4、 原位雜交
在保持細胞形態條件下,進行細胞內雜交,顯影或顯色.可用於dna或rna分析.螢光原位雜交(fish)進行染色體dna分析可用於生物學研究的許多領域以及臨床細胞遺傳學研究.
其主要優點是不僅可以在細胞**的中期,而且可在**間期核中診斷染色體的變化.
廣義的核酸雜交就是指非同源的核酸分子間的復性(氫鍵結合)過程.因此可以說,目前的基因檢測技術,除了質普法外都或多或少的涉及了核酸雜交原理.如pcr的引物復性過程、基因晶元的雜交檢測過程、基因測序的引物復性過程以及各種snp檢測方法等等.
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