DNA有RNA汙染,做實時PCR有影響麼

2021-03-10 17:01:34 字數 1114 閱讀 5595

1樓:匿名使用者

你這個bai

純度指的是260nm/280nm嗎?這個不能du區分zhidna和rna的

你是怎麼純化的dao的dna,有些方法得到的260/280會在回2左右

還有就是你做的答pcr是什麼pcr?你的引物cover的範圍在什麼地方?如果不在exton或者有進入intron和non coding seq的地方就無所謂了

而且還要看你的rna來自何處,如果是同一批細胞或者組織的rna,有也無所謂啊(我想不出做pcr有什麼是必須只能amplify dna而不能從rna來的),如果是外源的才會有問題。

一般我們不擔心rna汙染dna的問題,因為rna更加脆弱,rnase又幾乎無所不在

如果你非常擔心這個問題的話,以後純化dna的時候用dnase free rnase處理一下就不會有問題了

2樓:匿名使用者

是做拷貝數檢bai測嗎?

dna純度1.9~2.0,實際還算

du正常咯,建議你跑個電泳zhi 看一下 有沒有dao降專解屬及大坨的rna.如果沒有降解的話,做模版應該沒問題;如果確實有很多rna(我估計不太可能),也沒關係,rna很易降解的,你將樣品在四度放幾天說不定rna就沒了,實在不行的話,你加點dnase- free rnase 37度處理30min,酚/氯仿抽提,然後無水酒精沉澱,ok

3樓:匿名使用者

一般的pcr沒事的,直接做就好了!

4樓:匿名使用者

沒事。難道你要用dna做表達麼?

如果有內含子的話,長的是dn**段,沒有內含子的話,那就沒所謂了

5樓:匿名使用者

首先確認下,你是用基因組做模板上q-pcr做表達的嗎??? 是做探針的還是螢光染料sybr green ⅰ?

dna有rna汙染影響rt-pcr實驗麼

6樓:匿名使用者

首先,bairna不能用於pcr擴增的du

模板,因此有rna汙染zhi的dna不會影響擴增dao;其次,rt-pcr指的是從版rna反轉錄成權dna再進行擴增的過程,因此,不存在rna汙染dna的說法,只有後者汙染前者的說法。

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