如何判定螢光定量結果的真實性

2021-03-10 17:57:53 字數 1022 閱讀 2877

1樓:北京厚德交通科技****

如何判定bai螢光定

量結果的真實性du

螢光定量pcr(real-time pcr)是目zhi前基因表dao達定量分析的重要檢測手段專,已經為屬

越來越多的研究者所採用。「好的開始是成功的一半」,perrez-novo等(perrez- novoet al., 2005)曾報道獲得高質量rna對後續pcr定量結果的準確性是非常重要的,而高質量rna是獲得高質量cdna的必要條件,所以本文著重介紹一下如何獲得高質量cdna。

高質量cdna應具備以下幾個特點:無基因組dna殘留、能準確反應出樣本真實的轉錄情況和資訊完整且濃度適當等特點。

高質量cdna應保證無基因組dna殘留

在提取rna的過程中,常常會有基因組dna的殘留,從而導致實驗結果的不準確性或假陽性結果的出現。 2023年,nature protocol的一篇關於螢光定量pcr實驗研究的文章1中明確指出,在合成cdna第一鏈之前應去除基因組dna殘留,以免cdna中有基因組dna的存在,影響高靈敏度的螢光定量pcr實驗結果。

2樓:匿名使用者

螢光定du量pcr(real-time pcr)是zhi目前基因表dao達定量分析的重要檢測回手段,已經為答越來越多的研究者所採用。「好的開始是成功的一半」,perrez-novo等(perrez- novoet al., 2005)曾報道獲得高質量rna對後續pcr定量結果的準確性是非常重要的,而高質量rna是獲得高質量cdna的必要條件,所以本文著重介紹一下如何獲得高質量cdna。

高質量cdna應具備以下幾個特點:無基因組dna殘留、能準確反應出樣本真實的轉錄情況和資訊完整且濃度適當等特點。

高質量cdna應保證無基因組dna殘留

在提取rna的過程中,常常會有基因組dna的殘留,從而導致實驗結果的不準確性或假陽性結果的出現。 2023年,nature protocol的一篇關於螢光定量pcr實驗研究的文章1中明確指出,在合成cdna第一鏈之前應去除基因組dna殘留,以免cdna中有基因組dna的存在,影響高靈敏度的螢光定量pcr實驗結果:

實時定量PCR的結果分析實時螢光定量PCR的結果該怎樣分析?

sybergreen可以和所有核酸結合,沒有特異性。所以要保證特異性的話,最好用其他的方法。擴增體系中加入模板dna的體積,比如同時10微公升的體系,對照組加1微公升dna,實驗組加2微公升dna,則實驗組的加樣量是對照組的2倍。看ct值是分析螢光定量pcr最直觀的乙個資料,ct值一般在35左右就失...

新聞真實性的概念與文學真實性的概念是不是一回事

不是。新聞追求的真實是不以人的意志為轉移的客觀現實,跟事實有關的所有資訊都必須保持和原本一致。文學的真實是一種藝術化的真實,也就是文學作品必須反映人與社會真實的某一面,比如對人的真實情感的反映,對人性的真實反映等,這種真實可以通過虛構的人物和事件來實現。新聞真實性與歷史,文學真實性的區別 文學寫作的...

歷史著作的真實性

這你要看是哪方面的著作。比如二十四史來說,每乙個王朝都是編輯前乙個朝代的史書,這裡面的真實性很高,基本就是正史,可是在一些細微的處理上可能會對前朝進行改寫,這就要求在關注乙個朝代的同時去閱讀那個朝代的其他學者所寫的書,從中發現真相。要看誰來寫,目前國外嚴謹的學者的關於中國的歷史大多較真實 中國學者寫...