1樓：**ile嗨是我
一般認為，感受態細胞製備過程和質粒轉化過程會使宿主細胞活力受損，所以在轉化完後，會在lb培養基中活化一小時，使細胞恢復活力。
做質粒轉化感受態，加質粒後需不需要混勻（感受
2樓：匿名使用者
這個對照不太對bai,因為加質粒
du塗板一般zhi那個平板是有抗
生素的dao,而不加質粒塗板一般是需專要屬不加抗生素的,沒有對照的意義.一般是找乙個以前做過的或者比較有代表性的質粒轉化後作為對照,這樣才能顯示出感受態的好壞,否則不轉質粒,「感受態細胞」這個詞也無從說起.20個小時不長，基本就是不長了。
雖然不同的抗生素生長的速度不太一樣，但是16個小時肯定長了。除非你的不是大腸桿菌，或者不是在37度培養的。你仔細看看，是不是弄錯了抗性。
當質粒加入宿主細胞進行轉化，為什麼在塗佈含有amp的lb培養基平板前要在lb培養基
3樓：浙大阿公尺巴
要在培養基中37℃活化一小時？
因為要讓大腸桿菌恢復活力以及適應培養基，微生物在環境改變的時候會進入一段適應期，產生所需要的酶系以便於在新的培養基中生存。
4樓：壞蛋走走
剛做完轉化,質粒在細菌中還不能表達,要給他一段時間繁殖之後才具有抗性,這就是所謂的表型延遲.
大腸桿菌的轉化原理及方法
5樓：正保醫學教育網
所謂的轉化是將外源dna分子引入受體細胞，使之獲得新的遺傳性狀的一種手段，它是微生物遺傳、分子遺傳、基因工程等研究領域的基本實驗技術。
在自然條件下，很多質粒都可通過細菌接合作用轉移到新的宿主內，但在人工構建的質粒載體中，一般缺乏此種轉移所必需的mob基因，因此不能自行完成從乙個細胞到另乙個細胞的接合轉移。如需將質粒載體轉移進受體細菌，需誘導受體細菌產生一種短暫的感受態以攝取外源dna。細胞處於能夠吸收dna的狀態稱感受態，處於感受態的細胞稱作感受態細胞。
轉化過程所用的受體細胞一般是限制修飾系統缺陷的變異株，即不含限制性內切酶和甲基化酶的突變體（rˉ，mˉ），它可以容忍外源dna分子進入體內並穩定地遺傳給後代。受體細胞經過一些特殊方法的處理後，細胞膜的通透性發生了暫時性的改變，成為能允許外源dna分子進入的感受態細胞。進入受體細胞的dna分子通過複製，表達實現遺傳資訊的轉移，使受體細胞出現新的遺傳性狀。
將經過轉化後的細胞在篩選培養基中培養，即可篩選出轉化子（即帶有異源dna分子的受體細胞）。
質粒轉化大腸桿菌的目的，當質粒轉化進大腸桿菌時，通過什麼原理表達目的基因
質粒是真核細胞bai細胞核外或原核生物du擬核區外能夠進行自zhi主複製的遺傳 dao單位，包括真核專生物的細胞器 屬主要指線粒體和葉綠體 中和細菌細胞擬核區以外的環狀脫氧核糖核酸 dna 分子。現在習慣上用來專指細菌 大腸桿菌 酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的dna以外的dna分子。在基因工...
質粒轉化後下一步做什麼,做質粒轉化感受態,加質粒後需不需要混勻感受
一般肯定是要搖菌,擴增培養,然後凍存菌種的。這之後可以用細菌表達轉染的質粒。你想做什麼就做什麼啊,根據你的目的。質粒的轉換的方法有哪些?質粒轉化後如何篩選?轉化的方法 來最常用的是感受態法,包源括熱激和電轉bai 化等,轉染不是轉化du,這是不同的zhi概念。轉化dao後,可以根據質粒上帶有的某種特...
感受態細菌轉化時需要多大的質粒濃度
100 500ng ul。質粒轉化不少於 bai10的du5次方,zhi連線產物不少於10的6次方。兩種質粒dao是可以同時進入同乙個 版感受態細胞的,比如構建權腺病毒載體時。但是要求兩種質粒進入同乙個感受態細胞,轉化效率非常低,一般需要電轉或者其他的特殊處理。增加收菌次數,相對提高了質粒的量,這樣...