質粒轉化後下一步做什麼,做質粒轉化感受態,加質粒後需不需要混勻感受

1樓:佰草集

一般肯定是要搖菌,擴增培養,然後凍存菌種的。這之後可以用細菌表達轉染的質粒。。。你想做什麼就做什麼啊,根據你的目的。

質粒的轉換的方法有哪些?質粒轉化後如何篩選?

2樓:匿名使用者

轉化的方法:來最常用的是感受態法,包源括熱激和電轉bai

化等,轉染不是轉化du,這是不同的zhi概念。

轉化dao後,可以根據質粒上帶有的某種特殊基因的表達來鑑定菌落,最常用的有:抗藥性基因的表達,比如質粒帶有氨苄抗性基因,能在amp平板上長的一般可以初步判斷為轉化成功的菌;還有就是顯色篩選,比如質粒上的lacz基因表達,間接促使新增了x-gal的培養基變藍,綠色螢光蛋白基因表達後菌落發螢光等。

3樓:匿名使用者

主要有電轉染和化學轉染2種。

質粒一般帶有抗藥基因。把轉化後的細胞至於含藥的培養基。沒有轉化的細胞不能存活。

做質粒轉化感受態,加質粒後需不需要混勻(感受

4樓:匿名使用者

這個對照不太對bai,因為加質粒

du塗板一般zhi那個平板是有抗

生素的dao,而不加質粒塗板一般是需專要屬不加抗生素的,沒有對照的意義.一般是找乙個以前做過的或者比較有代表性的質粒轉化後作為對照,這樣才能顯示出感受態的好壞,否則不轉質粒,「感受態細胞」這個詞也無從說起.20個小時不長,基本就是不長了。

雖然不同的抗生素生長的速度不太一樣,但是16個小時肯定長了。除非你的不是大腸桿菌,或者不是在37度培養的。你仔細看看,是不是弄錯了抗性。

關於質粒轉化 5

5樓:匿名使用者

1.電擊轉化時通過瞬時高壓使細胞表面出現微小的孔洞,從而使外源dna能通過孔洞進入到細胞裡面,一般適用於革蘭氏陽性細菌或者真核微生物;

熱激轉化是使用鈣鹽或者鎂鹽溶液在低溫狀態下處理細胞使其處於感受態狀態,然後通過短時熱激使其吸入外源dn**段,主要應用於革蘭氏陰性細菌。

這些我想你應該懂的。我就不贅述了。

2.大腸桿菌作為革蘭氏陰性細菌,使用一般的化學轉化即熱激轉化就可以了,為何要勞神費力使用電轉化?轉化的目的不就是簡單而方便為原則麼?正所謂殺雞焉用牛刀?

希望我的回答對你有幫助。

6樓:牧星星的風

電擊轉化要注意很多問題,建議查查實驗步驟以及注意事項

,比如宿主菌需要養到對數期,比如連線及pcr產物與質粒的轉化也不一樣,前兩者需要進一步純化後再電轉,質粒卻不需要,但不可以加多,一般1-2微公升即可。

7樓:匿名使用者

果斷不懂,我是打醬油的,,,

轉殖和質粒構建是做什麼的

8樓:養你過年吃肉

質粒是現代分

bai子生物學du中常用的載體之一,

質粒構建,zhi就dao是指把特定

的基因序列插入內到工程質粒容中。

但僅僅插入質粒是不夠的,還需要把質粒轉化到細菌、細胞或酵母中,使質粒在其中擴充套件或表達。以細菌為例,轉化後的細菌還需塗佈到平板,使之分散為單個細菌,在合適的條件下培養,單個細菌長成菌落,這時,這個菌落的所有的菌都是有乙個細菌**而來,其狀態和攜帶的質粒是一致的,就俗稱乙個「轉殖」,用於後續實驗。

從無性繁殖的角度來講,上述的「轉殖」和轉殖羊的「轉殖」概念是一致的。

9樓:匿名使用者

質粒構建應該就是構建轉殖。