1樓：手機使用者
實習報告
實習目的
實習是在校大學生唯一一次接觸工廠大規模生產的機會，是學生走上社會的良好過渡，走向工作崗位的入門之課。實習讓我們瞭解到理論和實踐之間的差異，找到了工廠大規模生產和實驗室小量操作的異同。加深我們對所學知識的理解和消化，同時也學習到各工廠的許多技術細節，掌握了生產的基本工藝原理。
這次實習提高了自己培養髮現，分析，解決問題的能力，受益非淺，達到了實習的效果。
實習具體歷程及主要內容
1 8月5日—6日：在金宇生物製藥****參觀實習牛口蹄疫疫苗， 非五
類疫苗及禽流感疫苗
2 8月10日到達塞北星啤酒廠參觀實習
3 8月23日伊利參觀實習，它們主要分為4個部門：冷飲，液態奶，原奶，
奶粉部。採用現代化機器大規模生產各類產品。
4 8月23日下午：雙奇製藥****主要生產片劑，膠囊類藥物，如金雙
奇，定君生等
5 8月24日-8月26日：託縣金河集團，主要參觀了飼用金黴素，鹽酸金黴
素的生產
（以金河集團和金宇生物製藥****為主）
金河集團是託縣一個正在蓬勃發展的一個大型民營企業，主要生產飼料新增劑——金黴素，產品遠銷國美國、澳大利亞。金黴素生產車間有四個發酵車間和兩個提煉車間，還有一個新建未投產的精練車間。
生產金黴素的工藝流程：
一、接種
所接的菌種是金色鏈絲菌，採用沙土培養。主要是在接種室中進行，注意無菌操作。
二、發酵
將接好的菌種接入實罐滅菌（即罐與培養基經過高溫高壓一起滅菌）後的種子罐。經一段時間的擴大培養後，將菌種接入總髮酵罐，讓菌種生長產生菌絲。發育到一定程度，將其分別接入發酵罐中，在這些發酵罐中菌絲上長出點狀的次生菌絲，併產生金黴素（胞內分泌）。
發酵是關鍵步驟，需每6小時取樣檢測金黴素效價及含糖量和氨基氮量；每1小時取樣來觀察菌絲的長勢及染菌程度和ph值。
1、測定效價
1）每一個發酵罐中的菌液各取兩罐，每罐2ml。
2）加入ph為1.2-1.4的草酸20g，破壞菌體，使細胞內的金黴素釋放。
3）稀釋2（n-1）倍，n為稀釋次數。菌體生長時間越長稀釋倍數越大。
4） 吸取稀釋後的溶液7ml於容量瓶中，加熱5分鐘。其中一管不加熱， 作
為空白。
5）測分光光度，測的分光光度值通過查表可得金黴素的效價。金黴素一般
效價是2.8-3.1。
2、檢測含糖量
a 所需試劑：6mol/l 鹽酸，斐林試劑ⅰ（cuso4），斐林試劑ⅱ（naoh+酒石
酸），碘化鉀，硫帶硫酸鈉，澱粉指示劑。
b 檢測過程
1） 吸取0.5ml樣品，加入10ml鹽酸，加熱水解得到澱粉水解物。
2） 在澱粉水解物中加入10ml斐林試劑ⅰ和斐林試劑ⅱ，煮沸3分鐘，溶液
成蘭色。
3） 蘭色產物中加入5ml碘化鉀和10ml鹽酸（6mol/l），滴定硫代硫酸鈉，
中途加澱粉指示劑，繼續滴定硫代硫酸鈉直到蘭色退去。
4） 記錄樣品所消耗的硫代硫酸鈉的量，與空白所消耗的硫代硫酸鈉的量相
減，差值查標準糖含量表得其含糖量。
3、氨基氮含量的測定
a 所需試劑：蒸餾水，甲基紅指示劑，硫酸，氫氧化鈉，甲醛。
b 過程
1） 取50ml蒸餾水，加入5ml樣品、2滴甲基紅指示劑和1滴硫酸。搖勻，
樣品變紅。
2） 加入氫氧化鈉使溶液為黃色。
3） 黃色溶液中加入10ml甲醛緩衝液，搖勻，靜置10分鐘。
4） 滴定氫氧化鈉，溶液由黃色變為紅色。記錄所消耗的氫氧化鈉的量，查
氨基氮含量表，可得含氨基氮的量。
4、觀察菌絲的長勢
從各種子罐和發酵罐中取樣塗片，美蘭染色，油鏡下觀察。一般情況是：
1） 種子罐中菌絲形狀的變化
接入孢子 單支狀 束狀 團狀 網狀
當種子罐中的菌絲長到網狀時就必須接入發酵罐中。
2） 發酵罐中菌絲形狀的變化
小束狀，網狀 單根狀 均勻點狀（產金黴素）。
5、染菌情況的測定
樣品放於肉湯培養基中培養（加甲基紅），14小時後，觀察培養基顏色的變化。變黃，則染的菌是產鹼菌：變紅，則染的菌是產酸菌。
然後鏡檢計數，計算出染菌量。若較嚴重，加入硝石滅菌：若很嚴重，到掉髮酵液，重新滅菌。
檢測染菌的關鍵時期是種子罐期和發酵罐的前期、中期。因為這些時期黃色鏈絲菌沒有大量分泌對雜菌生長具有抑制作用的金黴素。
6、測ph值；用ph值精確測量儀測從各罐取來的樣品，記錄。
三、發酵車間工藝流程控制點
1、 種子罐
1）罐溫：全程控制為320c
2）罐壓：全程控制0.04mpa(移種後進氣閥開一圈，控制排氣閥)
2、 發酵罐
1）罐溫： 0hr 15hr 18hr 21hr 放罐
2）ph值：全程： 0hr 60hr 放罐
3）總糖（%）：0hr 30hr 80hr 放罐
4）殘糖：2.0%以下
5）空氣壓力：全程0.03mpa（排氣閥全開，控制進氣法閥的壓力0.02—0.03
mpa）
3、 空氣溫度：450c—550c（陰天控制550c—600c）
4、 消後引數
1）種子罐：總糖 4.0%—5.0%
2）發酵罐：總糖 6.5%—7.5%
3）補料： 總糖 32%—40%
四、提煉
發酵好的發酵液通過管道進入提煉車間，在鈣化罐中進行鈣化，所用的鈣化劑是碳酸鈣，它利用鈣離子替換兩個氫離子，使金黴素結晶。將含有結晶金黴素的菌絲體通過板框過濾，擠出水分成濾餅，然後乾燥。
五、分裝
分裝時按照不同的含量進行配比，達到特定的含量，包裝。
六、精練
精練車間是對發酵好的發酵液進行酸化、板框過濾 、濾液 、再濾、濾液 、沉澱、過濾 、初品、過濾 、抽提、過濾 、結晶、離心、乾燥，純度達到95%以上。其通過沉澱結晶的方法精練金黴素，過程如下：
1、發酵液的預處理和過濾
發酵液草酸化至ph1.4—1.6，加0.08%—0.10%（w/v）黃血鹽和硫酸鋅，板框過濾，吹乾。
2、複鹽沉澱
加入1.0%—1.2%（w/v）碳酸鈣，1.8%—2.5%（w/v）氯化鎂，用氨水調ph至7.8，板框過濾，吹乾。
3、溶解 淨化 過濾
按抽提4—6萬單位/毫升懸浮於水中，加草酸，用化學純鹽酸調ph至1.6—1.7，加入0.
08%—0.10%（w/v）黃血鹽和硫酸鋅，加0.05%（w/v）亞硫酸氫鈉，板框過濾。
4、結晶
加入4%—6%化學純鹽酸，升溫到40c，1小時（ph4.5—5.0）
5過濾洗滌
真空過濾，用水和乙醇洗滌，得到鹽酸金黴素溼晶體。乾燥，得到純度為95%以上的鹽酸金黴素。
金宇生物製藥****是生產口蹄疫疫苗和少量其他疫苗如禽流感疫苗的公司，生產藥品達到四十多種，分六個車間，其中四個已通過國家gmp認證，在國內有很大的影響力。口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的，偶蹄獸發生的一種高接觸性傳染病，傳染速度驚人，發病率高。其典型症狀為家畜口腔、鼻和蹄等地方出現大量水泡，同時伴有燒腫等症狀。
嚴重影響了畜牧業的發展。
口蹄疫疫苗工藝流程
總流程：準備工段 細胞培養 病毒複製 滅活阻斷 乳化 分裝 檢驗 銷售
一、細胞培養
1）培養細胞 生產口蹄疫疫苗所用的細胞是金黃色倉鼠腎細胞（bhk21），它是一種傳代細胞，最多不超過14代，多為成纖維細胞。
2）培養液 培養細胞所用的營養液是乳漢液與45%的mem培養基和新生牛犢血清。其中乳漢液由甲液、乙液和水解乳蛋白混合而成。
甲液：nacl 80g 乙液: nah2po4.12h2o 15.2g
kcl 40g kh2po4 6g
cacl 14g 葡萄糖 100g
mgso4.7h2o 20g 1%酚紅 160g
3）培養 轉瓶培養，在細胞生長過程中要進行鏡檢，觀察細胞的長勢。
4）雜檢 可觀察培養液顏色。
5）細胞消化 當細胞長到一定程度，就用分散液對貼壁生長的細胞進行分散處理。所用的細胞分散液是edta—胰酶（1：250）分散液：
nacl800g ,kcl40g,葡萄糖100g,nahco358g, 胰酶50g,edta20g,混合。再向混合液中加入1%的酚紅，十萬單位/毫升的青黴素，十萬單位/毫升的鏈黴素
二 、病毒複製
1） 病毒性質 正20面體，易裂解成四個片段vp1（起免疫作用），vp2，vp3，
vp4。
2） 病毒培養條件 經過人工馴化。
3） 病毒維持液 當有90%以上的細胞被分散下來後，就換上維持液進行病毒複製。維持液（歐氏液）的配方如下：
nacl680g， kcl40g, mgso4.7h2o 20g,nah2po4.12h2o14g, 無水葡萄糖100g，1%酚紅200ml，無水cacl20g，水解乳蛋白500g，口蹄疫病毒5%—10%
4）培養 在病毒複製的過程中，要進行鏡檢，觀察細胞的形態的變化。
5）細胞病變 病變的細胞是圓形，排列不整齊，邊緣整齊，折光率好，透明。
6）收毒 當有75%—90%的細胞病變是就可收毒。因為病毒存於細胞中，所以要通過凍融的方法使病毒釋放。收回的病毒要進行無菌檢驗和效價的測定。
三 滅活阻斷
1）滅活 滅活是指病毒經過滅活劑的處理後，其抗原性儲存，遺傳性被破壞。所用的滅活劑是bea（過量）。bea在經過0.
2n的氫氧化鈉的作用下環化成bei，bei具滅活作用。加入滅活劑的病毒液，300c恆溫滅活28小時，每4小時攪拌一次，每次5分鐘。
2） 阻斷 滅活28小時後，要立即用阻斷劑將滅活過程阻斷。所用的阻斷劑（過量）是帶2個結晶水的硫代硫酸鈉。阻斷完後要進行無菌檢驗和安全檢驗。
3）乳化 乳化的目的是將病毒製成雙向疫苗，即水包油包水，可持久免疫。
水相和油相的配方：
水相：抗原液 96份 油相：白油 9份
土溫—80 4份 司班—80 1份
總量 66.6份 總量 33.3份
四 乳化過程
向33.3份水相中加33.3份油相，在均質機中混勻，形成油包水，然後再
向油包水中加入33.3份水相，使之在油包水的基礎上再形成水包油。然後進行無菌檢驗，物理性狀的檢驗，測黏度和粒度。
五 分裝
分裝完後再進行無菌檢驗，安全檢驗和效檢。
塞北星啤酒廠生產的啤酒是以麥芽為原料，酵母發酵，co2起泡，低酒精濃度（0.5-4.5%）的飲料。
其主要原料是大麥，玉米等，經過選麥，備類，浸麥，發芽，焙燥得分級處理，通過粉碎，固態糖化，發酵，冷卻流程得到了清澈透明的啤酒。
伊利集團是內蒙古自治區大型奶製品加工製造企業，其先進的生產技術和現代化的流水線方便了我們的參觀。該廠的純奶滅菌採用超高溫1360c-1400c滅菌3-4s和850c巴氏滅菌。用活性碳過濾器，反滲透膜，混床（陰、陽離子樹脂），石英砂，微孔過濾器，o3殺菌等一系列方法徹底滅菌，使產品的質量得到保障。
雙奇製藥廠以生產金雙歧（golden bifid）類產品為主，其產品為活菌製劑。雙歧桿菌即保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌。菌種通過滅菌（滅菌後72小時需重新滅菌），接種，厭氧培養，離心，凍幹，粉碎，等過程變為成品，分為片劑（泡罩包裝）和膠囊類（硬鋁包裝）藥物兩類，其產品有金雙奇，定君生等。
總結：隨著近年來微生物學的迅速發展，微生物已經得到了廣泛的應用，尤其是在生物製藥和食品工業中，由於其具有培養簡單，繁殖快，生產能力強，裝置簡易等特點，使各生物公司能大規模的生產各種生物製劑。我們這次實習下了車間，切實感受到了工廠的大規模操作，認識、瞭解了大部分的儀器，掌握了少數裝置的操作。
明確了工廠生產的細節操作和整體的工藝流程，尤有體會的是工廠生產時的無菌操作。為我們在實驗室的無菌操作加深了影響，也將為我們以後從事的工作打下紮實的基礎。這次實習的地點很有針對性，讓我們真正學習到了在課本和實驗室學習不到的東西，是一次非常成功的實習。
04年暑期社會實踐報告
內蒙古大學生命科學學院
2001級生物技術專業章僑嬰
實習生怎麼轉正呢實習生多久可以轉正
實習生如果是在校生，是沒有五險一金。在校生不能夠籤勞動合同，在校生不具備法律法規規定的主體資格，在校生與企業屬於實習關係，不屬於勞動關係。實習屬於教學大綱規定的學習內容之一，可以不簽訂勞動合同，不繳納社會保險，但實習期間不記錄考勤 不承擔企業的勞動定額。一旦實習生取得了畢業證，用人單位必須按照 勞動...
實習生沒有工資合法嗎，實習生沒有工資合法嗎，違反什麼法律嗎？
大學bai生實習生沒有工資是不符合相 關規du定zhi的，根據相關規定，應當支付dao不低於本單位內相同崗位試用期工資標準容的80 的工資。普通單位實習生，根據實習時簽訂的實習合同為準，根據合同約定來決定是否支付工資。根據 職業學校學生實習管理規定 第十七條 接收學生頂崗實習的實習單位，應參考本單位...
實習生找工作難嗎，實習生找工作應該注意什麼？
從以下渠道來bai來找工作 1 中介du機構舉辦zhi 的現場招聘會，2 媒dao體發布的招聘信版息 3 網權上如中華英才網 前程無憂 智聯招聘以及地方招聘 的招聘資訊 4 親朋好友介紹的資訊。等等 這裡,最重要的是根據自己的專業 專長來找工作,以充分發揮自己的優勢.如自己專業競爭激勵,短期內無法找...