1樓:民生無小事
是按實驗原理得到的,蛋白質在鹼性條件下和二價銅離子作用生成紫色物質,這樣才能檢測蛋白質的含量。
雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅,而氫氧化鉀。
僅僅是為了提供鹼性環境。因此,在使用雙縮脲試劑時候,必須是先加氫氧化鈉。
溶液,再加硫酸銅的水溶液。
若先加入硫酸銅溶液,再加入氫氧化鈉溶液,則無法充分製造鹼性環境,此時硫酸銅會與氫氧化鈉發生複分解反應。
生成藍色氫氧化銅沉澱,導致現象不清,無法較好地達到實驗目的。
2樓:匿名使用者
雙縮尿遇蛋白質會變成紫色,這樣可以檢測蛋白質的存在。試劑的順序問題,先加硫酸銅,後加氫氧化鈉的話。由於硫酸銅為重金屬鹽,能使蛋白質變性,影響檢測。
雙縮脲試劑檢驗蛋白質成什麼顏色
3樓:惠企百科
加雙縮脲試劑a不變色,後加雙縮脲試劑b生成紫色沉澱。
雙縮脲反應的實質是:在鹼性條件下,銅離子cu2+與醯胺鍵(也就是高中所說的「肽鍵」)反應生成紫紅色複合物。
所謂雙縮脲是由兩分子尿素經脫氨縮合而成的化合物。該化合物在鹼性溶液(先滴入的naoh)中能與cuso4反應產生紫色絡合物,此反應稱雙縮脲反應。蛋白質分子中含有許多與雙縮脲結構相似的中孫肽鍵,因此也能起雙縮脲反應,生成紫色絡合物。
雙縮脲試劑是如何檢測蛋白質?
4樓:熱心市民小何
蛋白質分子中含有很多和雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能起雙縮脲反應,形成紅紫色絡合物。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時,試液中的銅與多肽配位,絡合物呈紫色。可通過比色法分析濃度。
雙縮脲法測定蛋白質的優缺點:
優點:雙縮脲法測定蛋白質的測定範圍是1~10mg蛋白質,操作簡單、快捷。既適合手工操作,又適合自動化分析,重複性好、線性關係好,雙縮脲試劑可以長期儲存。
缺點:靈敏度差,測定範圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質產生顏色的深淺相近,因此它常用於需要快速,但並不需要十分精確的蛋白質測定。
干擾測定的物質包括有:在性質上是氨基酸或肽的緩衝液,如tris緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。
雙縮脲法測定蛋白質,是由於蛋白質有什麼, 解釋一下原因
5樓:犁煊鮑佩玉
*雙縮脲。
1、雙縮脲是一種化學物質,而檢測蛋白質用的那兩個試劑之所以叫雙縮脲試劑,是因為檢測原理和雙縮脲的形成相似。
2、雙縮脲(nh3conhconh3)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出乙個分子氨後得到的產物,在強鹼性溶液中,雙縮脲與cuso4形成紫色絡合物,雙縮脲反應產生的紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。
3、反應原理:雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。
可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑑定反應的靈敏度為5-160mg/ml。
6樓:柯巧鬱晴照
是由於蛋白質結構中有兩個以上肽鍵,一般含兩個或以上肽鍵結構的物質都有該反應。
用雙縮脲試劑檢驗蛋白質時為什麼要在鹼性環境下
7樓:宰熹旗攸
因為雙縮脲(h2noc-nh-conh2)在鹼性溶液中能與cu2+結合生成紫色絡合物,蛋白質分子中含有與雙縮脲結構相似的肽鍵。
蛋白質的檢測:
試劑組成:a液:質量濃度為的naoh溶液;
b液:質量濃度為的cuso4溶液。
使用方法:先加a液造成鹼性環境,再滴加b液。
無需加熱。鑑定前,留出一部分組織樣液,以便對比。
在蛋白質的鑑定實驗中,最好選用富含蛋白質的生物組織,植物材料常用的是大豆,動物材料常用的是稀釋的雞蛋清。
雙縮脲試劑是乙個用於鑑定蛋白質的分析化學試劑。它是乙個鹼性的含銅試液,呈藍色,由氫氧化鈉或氫氧化鉀、硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。會遇到蛋白質顯紫色。
雙縮脲試劑檢驗蛋白質成什麼顏色
8樓:完顏琇瑩城毅
雙縮脲反應是指具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在鹼性條件下與cu2+反應,生成紅紫色的絡合物。所有的蛋白質均有此顯色反應。雙縮脲試劑就是指能與具有兩個以上肽鍵的化合物發生紅紫色顯色反應的試劑。
它是naoh和cuso4兩種溶液。在實驗過程中,先在含蛋白質的溶液中加入等體積的naoh溶液,混合均勻後,再滴幾滴cuso4溶液(量較少).即先後加入naoh和cuso4溶液。
如果在naoh中滴幾滴cuso4溶液混合後,再加入到含蛋白質的溶液中,混合液中就沒有cu2+,顯色反應就不會發生。除-conh-有此反應外,-conh2-,-ch2-,nh2-,-cs-cs-nh2,等基團亦有此反應。
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