螢光定量PCR標準曲線,做實時螢光定量PCR實驗時,為什麼做標準曲線

2021-03-03 20:29:09 字數 912 閱讀 1999

1樓:匿名使用者

具體情況要看你做的這個基因在兩個物種中的同源性。如果同源性很高,可以用同一對引物,回同一條探答

針的話,那我們就認為它在realtimepcr中的擴增效率是一樣的,標準曲線只要做一次就行了,對資料分析不會有影響

我要用ct法做螢光定量pcr,請問需要做標準曲線嗎

2樓:北京索萊寶科技****

最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.

調cdna就還了~

做實時螢光定量pcr實驗時,為什麼做標準曲線

3樓:

最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.

調cdna就還了~

怎麼判斷實時螢光定量pcr標準曲線是否準確

4樓:南京金益柏生物科技****

看標準曲線是否反映出了標準物質的真實濃度

怎麼判斷實時螢光定量pcr標準曲線是否準確

5樓:匿名使用者

看標準曲線是否反映出了標準物質的真實濃度

螢光定量pcr的標準曲線怎麼跑

6樓:瀟灑的熱心網友

採用相對法定量要求必須目的基因和內參具有相同的擴增效率,所以需要做efficiency curve如果得到的斜率小於0.1,可以採用相對法,否則,需要重新設計能達到相同擴增效率的引物,或者就需要製作標準曲線,製作標準曲線,可以將基因片段轉殖到質粒,然後體外轉錄成rna,定量以後合成cdna,然後按比例稀釋後做出標準曲線,或者可以採用乙個一直***的rna樣品,如細胞株,然後以此為標準製作.如果直接採用dna做標準,那前提是rna逆轉錄的效率一致.

怎麼判斷實時螢光定量PCR標準曲線是否準確

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實時定量PCR的結果分析實時螢光定量PCR的結果該怎樣分析?

sybergreen可以和所有核酸結合,沒有特異性。所以要保證特異性的話,最好用其他的方法。擴增體系中加入模板dna的體積,比如同時10微公升的體系,對照組加1微公升dna,實驗組加2微公升dna,則實驗組的加樣量是對照組的2倍。看ct值是分析螢光定量pcr最直觀的乙個資料,ct值一般在35左右就失...

實時螢光定量pcr技術原理是什麼

聚合酶鏈式反應 pcr 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 在擴增反應結束之後,版我們可以通過凝膠電泳權的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過 放射性核素摻入標記後的光密度掃瞄來進行定量的分析 無論定性還是定量分析,分析的都是 pcr 終產物。但是在許多情況下,我們所感興趣的是未經 pcr 訊號...