在進行芽孢染色時需要注意的事項有哪些

2022-09-17 12:02:03 字數 1557 閱讀 2409

1樓:科學普及交流

(1)選用適當菌齡的菌種,幼齡菌尚未形成芽孢,而老齡菌芽孢囊已經破裂。

(2)加熱染色時必須維持在染液冒蒸汽的狀態,加熱沸騰會導致菌體或芽孢囊破裂,加熱不夠則芽孢難以著色。

簡介:芽孢染色的方法:

(1)將培養24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌,作塗片、乾燥、固定。

(2)滴加3-5滴孔雀綠染液於已固定的塗片上。

(3)用木夾夾住載玻片在火焰上加熱,使染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸乾,必要時可新增少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4-5分鐘。這一步也可不加熱,改用飽和的孔雀綠水溶液(約7.

6%)染10分鐘。

(4)傾去染液,待玻片冷卻後水洗至孔雀綠不再褪色為止。

(5)用番紅水溶液復染1分鐘,水洗至水為無色。

(6)待乾燥後,置油鏡觀察,芽孢呈綠色,菌體呈紅色。

2樓:

方法一:

(1)將培養24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌,作塗片、乾燥、固定。

(2)滴加3-5滴孔雀綠染液於已固定的塗片上。

(3)用木夾夾住載玻片在火焰上加熱,使染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸乾,必要時可新增少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4-5分鐘。這一步也可不加熱,改用飽和的孔雀綠水溶液(約7.

6%)染10分鐘。

(4)傾去染液,待玻片冷卻後水洗至孔雀綠不再褪色為止。

(5)用番紅水溶液復染1分鐘,水洗至水為無色。

(6)待乾燥後,置油鏡觀察,芽孢呈綠色,菌體呈紅色。

注意:(1)選用適當菌齡的菌種,幼齡菌尚未形成芽孢,而老齡菌芽孢囊已經破裂。

(2)加熱染色時必須維持在染液冒蒸汽的狀態,加熱沸騰會導致菌體或芽孢囊破裂,加熱不夠則芽孢難以著色。

方法二:

(1)取二支潔淨的小試管,分別加入0.2ml無菌水,再往一管中加入1-2接種環的蠟狀芽孢桿菌的菌苔,另一管中加入1-2接種環的生孢梭菌的菌苔,兩管各自充分混合成濃厚的菌懸液。

(2)在菌懸液中分別加入0.2ml苯酚品紅溶液,充分混合後,於沸水浴中加熱3-5分鐘。

(3)用接種環分別取上述混合液2-3環於兩片載玻片上,塗薄,風乾後,將載玻片稍傾斜於燒杯上,用95%乙醇沖洗至無紅色液流出。

(4)再用自來水沖洗,濾紙吸乾。

(5)取1-2接種環黑色素溶液於塗片處,立即塗薄,自然乾燥後,油鏡觀察,在淡紫灰色背景的襯托下,菌體為白色,菌體內的芽孢為紅色。

芽孢染色的原理

3樓:匿名使用者

利用細菌的芽孢和菌體對染料的親和性不同,採用復合染色法可以區分細版菌的芽孢權和菌體 由於芽孢壁厚通透性低,著色和脫色均較困難,因此如果在加熱條件下,先用一種弱鹼性染料,如孔雀綠或鹼性品紅在加熱條件下染色,使染料進入菌體和芽孢,菌體中的染料可經水洗洗脫,而進入芽孢的染料則難以透出,再用復染液處理,從而使菌體和芽孢呈現不同的顏色,便於區別。

4樓:黑南黑南

你是說孔雀石綠染色麼?還是一般的結晶紫染色?如果是一般的結晶紫染色的話,因為芽孢的外壁結構緻密,所以結晶紫無法進入芽孢內部將其染色,因此呈現透明狀

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