1樓：暴走愛生活
一般要看流動相的組成了。
經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱。
因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分離後的樣品是被分級收集後再進行分析的，使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較複雜。
直到20世紀60年代．發展出粒度小於10μm的高效固定相，並使用了高壓輸液幫浦和自動記錄的檢測器，克服了經典液相色譜的缺點，發展成高效液相色譜。
也稱為高壓液相色譜。
液相色譜所用基本概念：
保留值、塔板數、塔板高度、分離度。
選擇性等與氣相色譜。
一致。液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致，但由於在液相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相，而液體和氣體的性質不相同。
此外，液相色譜所用的儀器裝置和操作條件也與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定的差別。
2樓：網友
一般要看流動相的組成了。配置好的或已經開瓶的情況下有以下幾條標準：
第一，純有機相，比如甲醇，乙腈等為1個月。
第二，水相（含超純水，磷酸水，乙酸水，緩衝鹽水，離子對試劑等）為10天。
第三，水相與有機相混合的為10天。
第四，有效期內，每一到兩天要進行脫氣。水相每兩天進行過濾、脫氣。
第五，有效期內如發現有長毛和渾濁，視為變質要進行重新配製。
第六，流動相原則要現用現配，儲存要注意季節及室內溫度等情況。
液相色譜的樣製備出來能放多久
3樓：ysa教育培訓小助手
可以放一天。一般要看樣品的狀悶局態穩不穩定，長不長雜質，一般24h內是穩定的。
進液相的樣品不可以放置很長時間。
在高效液相色譜。
hplc）中看的是保留時間，不同的樣品在不同的波長條件下是不同的。一般是在固定的波長的情況下看出現樣品的保留時間，如果流動相的流型有變化，被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬，柱效率降低。
液相色譜和質譜連線，可以增加額外的分析能力，數圓能夠準確鑑定和定量像細胞和組織裂解液，血液，血漿，螞畢讓尿液和口腔液等複雜樣品基質中的微量化合物。
液相色譜裡面能只用水做流動相嗎
4樓：千葉雅之
這個得看你的色譜柱。
一般的反相色譜柱不耐純水。如果用的話會特別費。
我當初做過乙個實驗，流動。
內相是的kh2po4，色譜柱是c18柱，大概半個月換一根吧。
特殊的色譜柱可以耐受純水，但是可能分離效果不好，峰型也不一定好。
另外，純水很 容 易 長微生物。一容般純淨水開瓶之後在25℃放置1天，過濾的速度就會緩慢，放三天就渾濁了。如果你的流動相是純水，那麼系統、色譜柱很容易堵塞。所以不建議使用。
5樓：哎_又見落葉
親水色譜。
也可以，一般用於反相色譜難以分離的物質。比如三聚氰胺，反相色譜很難有內保留，使用磺酸。
容鹽離子對試劑不夠穩定。這個時候選擇親水色譜比較好，但是也還是很少用純水作流動相的。
1、正相色譜。
正相色譜用的固定相通常為矽膠（silica）以及其他具有極性官能團胺基團，如（nh2，aps）和氰基團（cn，cps）的鍵合相填料。
由於矽膠表面的矽羥基（sioh）或其他極性基團極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中各組分的極性大小，即極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如正已烷（hexane），氯仿（chloroform），二氯甲烷（methylene chloride）等。
2、反向色譜。
反向色譜用的填料常是以矽膠為基質，表面鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相。反向色譜所使用的流動相極性較強，通常為水、緩衝液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分最先被沖洗出，而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。
液相色譜法什麼是固定相什麼是流動相
6樓：無錫酬信雕刻機廠家
在色譜法中，是利用溶液中被分離物質在兩相中分配係數不同以使組分分離的方法。其中一相為。
液體，塗布或使之鍵合在固體載體上，稱固定相；另一相為液體或氣體，稱流動相，流動相中攜帶。
了（ 溶解）待測的藥物。固定相就是用來分離物質的，流動相就是載體，將物質帶到固定相里並通。
過固定相的流體。在氣相里就是栽氣，在液相里就是液體，就叫流動相。也可以這樣理解，固定相是。
為了把樣品裡面的成分留下，固定住；而流動相則要把樣品的組分帶走進檢測器。不同的組分的能力不。
一樣導致了組分的分離。流動相是攜帶樣品進入分析流程的物質。固定相是用來分離被測組分的物質。
所以顧名思義，流動的一相即為流動相，固定不同的一相即為固定相。
固定相的選擇對樣品的分離起著重要作用，有時甚至是決定性的作用。不同型別的色譜採用不同的固定相，如氣-固色譜的固定相為各種具有吸附活性的固體吸附劑；氣-液色譜的固定相是載體表面塗漬的固定。
液，液相色譜中的固定相為各種鍵合型的矽膠小球，離子交換色譜中的固定相為各種離子交換劑，排阻色。
譜中的固定相為各種不同型別的凝膠等等。
色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質稱為流動相。與固定相處於平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。用作流動相的物質有：
氣體、液體、超臨界流體等。常見的流動相主要有：乙腈-水溶液、乙。
腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。
7樓：巫馬宛旋
用流動相稀釋樣品主要是為了提高分離度，增加理論塔板數，使峰形尖銳，對稱。具體理由如下：
色譜法的實質是樣品在流動相與固定相之間反覆分配的過程，這個過程在實際中會受到很多因素的影響從而造成分離度下降，理論塔板數降低，使得分離不理想。
根據液相色譜van
deemter方程h=a
cμ（a為渦流擴散係數，c為傳質阻抗係數，μ為流動相流速）。
渦流擴散主要由色譜柱本身造成。
傳質阻抗是阻礙組分分子在固定相和流動相之間達到平衡需要進行分子的吸附、脫附、溶解、擴散等過程的因素。在理想狀態中，色譜柱的傳質阻抗為零，則組分分子流動相和固定相之間會迅速達到平衡，在實際體系中傳質阻抗不為零。用流動相溶解稀釋樣品，是為了減少傳質阻抗，提高分離塔板數，使得峰尖銳，對稱。
8樓：藍藍藍藍藍
來了解固定相跟流動相的定義：
固定相：在色譜分離中固定不動、對樣品產生保留的一相。用來分離被測組分的物質，目的是把樣品裡面的成分留下，固定住；
流動相：載體，與固定相處於平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。是將物質帶到固定相里並通過固定相的流體，在氣相里就是載氣，在液相里就是液體。
液相色譜法：液體作為流動相的色譜法。其分離原理是混合物中各組分對兩相的親和力不同。根據固定相的不同，可分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。
氣相色譜中保留時間有什麼作用？
9樓：網友
被分離樣品組分從。
進樣開始到柱後出現該組分。
濃度極大值時的時間，也即從進回。
樣開始到出現某組答分色譜峰的頂點時為止所經歷的時間，稱為此組分的保留時間，用tr表示，常以分（min）為時間單位。
保留時間是由色譜過程中的熱力學因素所決定，在一定的色譜操作條件下，任何一種物質都有一確定的保留時間，有著類似於比移值相同的作用，可作為色譜定性分析的依據。
一種化合物在規定條件下在層析系統中的執行時間。是層析分離技術的乙個引數。
高效液相色譜樣品一定要用流動相配製嗎
10樓：百昕太史念珍
不一定。有的可以用水，有的可以用純的有機相，或者銷旁用比較易溶的溶劑。比如在做注射劑的時候還會用到生理鹽水或者葡萄糖。
等等。但是，用流動相配製是最安全的，也是最好的。第一，就是溶解度。
的問題。比如，乙個樣品在溶劑中易溶，到了流動相里就不容易溶虧山橡解了，那麼樣品可能會在遇到流動相的時候出現一些析晶的情況，有可能會堵塞色譜柱。
或則會唯羨進樣口。第二，是極性差異的問題。比如，用純的有機相溶解樣品，極性比較小，而流動相的極性比較大，樣品可能會出現乙個差異性，然後導致樣品峰分叉。
如果可以選擇流動相當然是最好的，如果選擇別流動相，只要對色譜峰的峰型沒有影響，其實沒有什麼問題。
樣品中加入流動相會有析出會不會影響色譜柱？
11樓：網友
樣品中加入流動相會有析出，不一定會影響色譜柱，但分析結果肯定一塌糊塗了。
固體樣品析出，進樣後，隨著流動相的流動，析出的樣品會一直被流動相帶入色譜柱中，最後出峰必然很寬，或者拖尾很長，液相色譜的分離度和準確度大大下降。因此，還是要更換為能夠全部溶解的流動相，來進行色譜分離，才能獲得好的分析效果。
12樓：微塵立畫
如果你的樣品在流動相里面會析出，就需要考慮更換其它類別的流動相，或者考慮樣品濃度是不是太大。如果樣品在柱子裡面析出了，會堵住液相的柱子，影響檢測結果。
液相色譜中流動相、固定相和保留時間的關係是怎樣的
13樓：高效液相色譜
一般極性大的樣品用反相色譜柱，流動相極性大培穗於固定尺備相極性，樣品極性越小，保留時間越長。極性小的樣品用正相色譜柱，流動相極性小於陵中毀固定相極性，樣品極性越大，保留時間越長。當然如果有其它保留機理，如氫鍵。
等，波流時間會變化。
固定相不同保留能力會有不同，如c8的保留能力弱於c18。
流動相根據不同的溶解能力、極性等也會影響保留時間，同時溶液ph值。
會影響樣品的狀態，也會影響保留時間。
液相色譜峰保留時間後移,液相色譜的保留時間標準與樣品為什麼會不一致
你如果是北方使用者的話,沒有柱溫箱。應該考慮是溫度的影響。最起碼你要保證室溫在25度以上,溫度低了保留時間會後移,同時柱壓力也會變高的。若干的可能性,逐個抄排除 如果是bai保留時間越來越短,du可能是zhi色譜柱不耐低ph,固定相有水解dao,應更換色譜柱,如 agilent stablebond...
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要注意的有兩bai點 1.流動相中du加酸的目 zhi的，是為了讓酸性的dao目標物處於游離回型，增加其被保答留的能力。2.色譜柱如果長時間用ph較低的酸性流動相，它對酸性物質的保留特性會保持一段時間。也就是說，如果你以前採用的都是正常條件，偶爾有一次忘了在流動相中加酸，有可能對結果沒有影響。如何判...
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