pcr的原理是什麼？PCR技術的原理？

1樓：生活達人小羅

pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。dna的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在dna聚合酶的參與下，根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子拷貝。

在實驗中發現，dna在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制dna的變性和復性，加入設計引物，dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製。

迴圈引數。1、預變性。

模板dna完全變性與pcr酶的完全啟用對pcr能否成功至關重要，建議加熱時間參考試劑說明書，一般未修飾的taq酶啟用時間為兩分鐘。

2、變性步驟。

迴圈中一般95℃，30秒足以使各種靶dna序列完全變性，可能的情況下可縮短該步驟時間。變性時間過長損害酶活性，過短靶序列變性不徹底，易造成擴增失敗。

3、引物退火。

退火溫度需要從多方面去決定，一般根據引物的tm值為參考，根據擴增的長度適當下調作為退火溫度。然後在此次實驗基礎上做出預估。退火溫度對pcr的特異性有較大影響。

2樓：我愛學習

pcr技術的基本原理：

該技術是在模板dna、引物和四種脫氧核醣核苷酸存在下，依靠於dna聚合酶的酶促合成反應。dna聚合酶以單鏈dna為模板，借助一小段雙鏈dna來啟動合成，通過乙個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈dna模板中的一段互補序列結合，形成部分雙鏈。

在適宜的溫度和環境下，dna聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3´-oh末端，並以此為起始點，沿模板5´→3´方向延伸，合成一條新的dna互補鏈。

pcr技術的應用：

pcr技術首次臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。

pcr在醫學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。理論上，只要樣本有乙個病原體存在，pcr就可以檢測到。

pcr技術不但能有效的檢測基因的突變，而且能準確檢測癌基因的表達量，可據此進行腫瘤早期診斷、分型、分期和預後判斷。

pcr技術的原理？

3樓：匿名使用者

教材中有一句話：pcr利用了「dna的熱變性原理」，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結合。