1樓:南京金益柏生物科技****
axygen生產很多
型別的pcr管,很多pcr儀都能在他家找到合適的管子。我們學院專bio-rad、rotor gene還有takara的機子都用的axygen的耗材。
不過屬abi的就得注意了,聽說相容性是最差的。我們實驗室用的是abi的step one,當時也想找替代的耗材,畢竟原廠的很貴。但是試了5、6種管子,楞是沒有合適的,要麼太長、要麼太細,要麼是管蓋不合適。
去年聽說axygen準備在國內生產step one專用的耗材,不過進展如何我就不知道了。
實時螢光定量pcr與普通pcr的區別是什麼?結果有何異同?能說明的問題是什麼?
2樓:麼破1自我
二者結果相同。都能說明生物體外的特殊dna複製的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。
區別:1、二者系統組成不同
螢光定量pcr儀比普通的pcr儀多了螢光訊號採集系統和計算機分析處理系統。
2、二者原理不同
螢光定量pcr實時監測與dna結合的螢光染料激發的螢光,普通ocr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量。
3、二者反應要求不同
螢光定量pcr對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp,普通pcr可以擴增長點的片段。
4、二者應用不同
螢光定量pcr主要是用來定量分析和確定基因轉錄水平的,普通的pcr儀是做定性分析和擴增基因片段,定量pcr儀可以做普通pcr儀的工作,反之不行。
5、二者測量成本不同
定量pcr儀**較為昂貴,普通的基因擴增儀(pcr儀)只能夠定性地分析是否存在目標片段。但是**要低很多,而且執行成本也要低很多。
實時螢光定量pcr技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的侷限,實現了每一輪迴圈均檢測一次螢光訊號的強度,並記錄在電腦軟體之中,通過對每個樣品ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。
3樓:匿名使用者
原理不同:螢光定量pcr實時監
測與dna結合的螢光染料激發的螢光;普通pcr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量,一般是紫外光。
反應要求:螢光定量對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp;普通定量可以擴增長點的片段。如果不需要檢測產物分子量大小,螢光定量可以不進行電泳就對產物進行定量分析,普通pcr必須電泳。
結果:螢光定量可以實現精確定量,普通pcr則不行。螢光定量體現可以看到整個擴增過程,可以看到擴增效率,溶解溫度,直接得到的標準曲線等,這些是普通pcr無法實現的。
如果還不清楚建議去丁香園等**逛逛,希望可以幫到你
4樓:匿名使用者
所謂實時螢光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入螢光基團,利用螢光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行「定量分析」的方法。
記住,實時螢光定量是定量分析
5樓:匿名使用者
螢光pcr是為了測量mrna表達量的 普通pcr是為了擴增目的片段的
6樓:匿名使用者
螢光定量是定量的,普通pcr是定性的,結果乙個是說明含有多少,另乙個說明有還是沒有,前者更精確一點
螢光定量PCR標準曲線,做實時螢光定量PCR實驗時,為什麼做標準曲線
具體情況要看你做的這個基因在兩個物種中的同源性。如果同源性很高,可以用同一對引物,回同一條探答 針的話,那我們就認為它在realtimepcr中的擴增效率是一樣的,標準曲線只要做一次就行了,對資料分析不會有影響 我要用ct法做螢光定量pcr,請問需要做標準曲線嗎 最好是做標準曲線,要看看擴增效率的....
實時定量PCR的結果分析實時螢光定量PCR的結果該怎樣分析？
sybergreen可以和所有核酸結合，沒有特異性。所以要保證特異性的話，最好用其他的方法。擴增體系中加入模板dna的體積，比如同時10微公升的體系，對照組加1微公升dna，實驗組加2微公升dna，則實驗組的加樣量是對照組的2倍。看ct值是分析螢光定量pcr最直觀的乙個資料，ct值一般在35左右就失...
螢光定量pcr裡的相對定量裡算delta deltaCt的對
你都有標準曲線了。就不用做delta deltact了，直接用樣本的ct值帶入標準曲線就可以了。delta deltact只用於相對值的測量。每乙個delta代表ct值相減一次。第一次是目標基因對照組和實驗組的ct值相減。第二次是內參基因對照組和實驗組ct值相減。得到的兩個數值算為2的xx次方，就是...